KO validierter monoklonaler Anti-MLH1-Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P40692

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von MLH1

• Das DNA-Mismatch-Reparaturprotein Mlh1 (MutL-Proteinhomolog 1) ist die katalytische Untereinheit des postreplikativen DNA-Mismatch-Reparatur(MMR)-Systems und bildet das MutL-alpha-Heterodimer mit PMS2 sowie das MutL-gamma-Heterodimer mit MLH3.
• MutL-alpha wird durch die MutL-alpha(MSH2-MSH6)- oder MutS-beta(MSH2-MSH3)-Komplexe an falsch gepaarte DNA rekrutiert; es aktiviert anschließend die PMS2-Endonuklease, um Strangbrüche einzuführen, was die Entfernung und Reparatur des Fehlpaares initiiert.
• MLH1 ist überwiegend im Zellkern lokalisiert und während der DNA-Replikation und Reparaturprozesse mit Chromosomen assoziiert.
• Wird in mehreren Geweben exprimiert, einschließlich Dickdarm, Lymphozyten, Brust, Lunge, Milz, Hoden, Prostata, Schilddrüse, Gallenblase und Herz.
• Posttranslationelle Modifikationen umfassen Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinkonjugation, die seine Stabilität und Funktion regulieren können.
• MLH1 wird als Tumorsuppressor klassifiziert; Keimbahnmutationen sind mit dem erblichen nichtpolypösen Kolorektalkrebs (HNPCC), auch bekannt als Lynch-Syndrom, verbunden.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 350–450 von humanem MLH1 umfasst; die Epitopspezifität sollte für die vorgesehenen Anwendungen überprüft werden.
• Für den Western Blot detektiert der Antikörper eine Bande bei etwa 85 kDa; validieren Sie mit humanen oder Maus-Zelllysaten mit bekannter MLH1-Expression und verwenden Sie nach Möglichkeit Knockout-Kontrollen.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) optimieren Sie Antigen-Retrieval-Bedingungen und Titration; vergleichen Sie Färbemuster mit der bekannten Gewebeverteilung und verwenden Sie Knockout-Gewebeschnitte als Negativkontrollen.
• Für den ELISA kombinieren Sie diesen Antikörper mit einem geeigneten Detektionsreagenz und validieren Sie mit rekombinantem MLH1-Protein, um Empfindlichkeit und Spezifität zu bestimmen.

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