[KO validiert] Anti-LDHA Kaninchen-Monoklonalantikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P00338

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: LDHA-Funktion und Lokalisierung

• LDHA (L-Laktat-Dehydrogenase A-Kette) ist ein Schlüsselenzym der Glykolyse, das die stereospezifische Umwandlung von Pyruvat und Laktat katalysiert, gekoppelt mit dem NADH/NAD+-Umsatz.
• Auch bekannt als LDH-Muskeluntereinheit (LDH-M), wird es vorwiegend in anaeroben Geweben wie Skelettmuskel und Leber exprimiert, wo eine hohe glykolytische Flussrate erforderlich ist.
• Lokalisiert im Zytoplasma, konsistent mit seiner Rolle im zytosolischen Stoffwechsel.
• Unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung, die seine Aktivität, Stabilität oder Interaktionspartner regulieren können.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen, obwohl ihre funktionellen Unterschiede noch vollständig charakterisiert werden müssen.
• Mutationen im LDHA-Gen sind mit der Glykogenspeicherkrankheit Typ XI (GSD11) verbunden, was seine kritische Rolle im Energiestoffwechsel unterstreicht.
• Das Protein hat ein Molekulargewicht von ca. 36,7 kDa (UniProt: 36689 Da), aber der Antikörper detektiert eine Bande zwischen 26-39 kDa, wahrscheinlich aufgrund von Isoformvarianten oder PTMs.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Der Antikörper wurde gegen ein synthetisches Peptid hergestellt, das den Aminosäuren 200-300 des humanen LDHA entspricht. Diese Region ist zwischen Mensch, Maus und Ratte konserviert, was die breite Kreuzreaktivität erklärt.
• Empfohlene Anwendungen sind Western Blot (WB), Immunfluoreszenz/ICC (IF/ICC) und ELISA. Für WB kann die detektierte Bande zwischen 26–39 kDa erscheinen; unter Berücksichtigung des vorhergesagten MW von ~36,7 kDa sollte die Bandenspezifität in Ihrem Probensystem validiert werden.
• Erwägen Sie die Verwendung geeigneter Gewebe- oder Zelllysate, die LDHA exprimieren, wie Skelettmuskel oder Leber, als positive Kontrolle.
• Für die Immunfluoreszenz ist eine Permeabilisierung erforderlich, da LDHA zytoplasmatisch ist. Validieren Sie das Färbungsmuster in relevanten Zelllinien.

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