[KO-validiert] Anti-LAMP2-Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, FC, ELISA – P13473

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von LAMP2

• LAMP2 (lysosomenassoziiertes Membran-Glykoprotein 2) ist ein stark glykosyliertes Transmembranprotein vom Typ I, auch bekannt als CD107b oder LGP-96. Durch alternatives Spleißen entstehen drei wichtige Isoformen (LAMP-2A, -2B und -2C), die jeweils eine unterschiedliche Gewebeverteilung und spezifische Funktionen in der Lysosomenfunktion aufweisen.
• Es spielt eine wesentliche Rolle bei der Lysosomenbiogenese, der Regulation des lysosomalen pH-Werts und der Autophagie. LAMP2 hemmt direkt den Protonenkanal TMEM175 und erleichtert dadurch die Lysosomenansäuerung, die für eine optimale Hydrolaseaktivität erforderlich ist. Zugehörige Referenzen: PMID:11082038, PMID:18644871, PMID:24880125, PMID:37390818
• LAMP2 ist ein zentraler Rezeptor bei der chaperonvermittelten Autophagie (CMA). Es bindet Substratproteine (z. B. GAPDH, GPX4, NLRP3), die vom Chaperon HSC70 erkannt wurden, und leitet sie zum lysosomalen Abbau weiter, insbesondere unter Hungerbedingungen. Zugehörige Referenzen: PMID:11082038, PMID:18644871, PMID:24880125, PMID:36586411
• Während der Makroautophagie ist LAMP2 für die Fusion von Autophagosomen mit Lysosomen erforderlich. Zellen ohne LAMP2 können STX17 nicht an Autophagosomen rekrutieren, wodurch der Abbau autophagischer Fracht verhindert wird. Zugehörige Referenzen: PMID:27628032
• LAMP2 trägt zur adaptiven Immunität bei, indem es die MHC-Klasse-II-vermittelte Präsentation exogener Antigene erleichtert; es fördert die Bildung antigenischer Peptide innerhalb des endosomalen/lysosomalen Kompartiments. Zugehörige Referenzen: PMID:15894275, PMID:20518820
• Während einer Infektion mit dem Mumpsvirus unterstützt LAMP2 die FURIN-vermittelte Spaltung des viralen Fusionsproteins F, indem es sowohl mit FURIN als auch mit dem unprozessierten viralen Protein interagiert.
• LAMP2 ist hauptsächlich in der Lysosomenmembran und in geringerem Umfang in Endosomen, Autophagosomen und der Plasmamembran lokalisiert.
• Isoformspezifische Gewebeexpression: LAMP-2A ist in Plazenta, Lunge und Leber reichlich vorhanden; LAMP-2B wird in zahlreichen Geweben exprimiert, darunter Milz, Thymus, Prostata und Hoden; LAMP-2C kommt im Dünndarm, Dickdarm, Herzen, Gehirn und in der Skelettmuskulatur vor. Zugehörige Referenzen: PMID:26856698, PMID:7488019

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der luminalen Domäne (Aminosäuren 29–375) des humanen LAMP2 und zielt auf ein extrazelluläres Epitop ab, das in nicht permeabilisierten Proben für die Oberflächenfärbung (z. B. FC) und in permeabilisierten Proben für den Gesamtnachweis zugänglich ist.
• Beim Western Blot beträgt das vorhergesagte Gewicht des Kernproteins 45 kDa. Aufgrund der umfangreichen N- und O-verknüpften Glykosylierung erscheint jedoch typischerweise eine breite Bande bei etwa 90–110 kDa. Verwenden Sie eine geeignete Positivkontrolle, beispielsweise ein Gesamtzelllysat von HeLa oder HepG2.
• Bei Immunfluoreszenz und IHC müssen die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen optimiert werden, um den lysosomalen Membrankompartiment zugänglich zu machen. Eine Co-Färbung mit lysosomalen Markern (z. B. LAMP1) kann zur Bestätigung der Lokalisation in Betracht gezogen werden.
• Für die Durchflusszytometrie erfordert die intrazelluläre Färbung (FC intra) eine Permeabilisierung der Zellen. Die Kompatibilität mit fluoreszenzkonjugierten Sekundärantikörpern und Fixierungsprotokollen sollte im spezifischen zellulären Kontext validiert werden.
• Dieser Antikörper wurde zur Bestätigung eines Knockouts validiert. Schließen Sie stets geeignete Knockout- oder Knockdown-Kontrollen ein, um die Antikörperspezifität in Ihrem Assay zu überprüfen.

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