KO validierter polyklonaler Anti-KRAS-Kaninchen-Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P01116

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von KRAS

• KRAS (GTPase KRas), auch bekannt als K-Ras 2, Ki-Ras, c-K-ras und c-Ki-ras, wird durch das KRAS-Gen (KRAS2, RASK2) kodiert. Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Protein-Isoformen.
• Es fungiert als Signaltransmitter im Ras-MAPK-Signalweg und reguliert Zellproliferation und Überleben (PubMed:22711838, PubMed:23698361). Zugehörige Referenzen: PMID:22711838, PMID:23698361
• KRAS bindet GDP/GTP und besitzt intrinsische GTPase-Aktivität, es wechselt zwischen aktiven und inaktiven Zuständen (PubMed:20949621, PubMed:39809765). Zugehörige Referenzen: PMID:20949621, PMID:39809765
• In kolorektalen Krebszellen trägt KRAS zur Onkogenese bei, indem es eine ZNF304-abhängige transkriptionelle Stilllegung von Tumorsuppressorgenen induziert (PubMed:24623306). Zugehörige Referenzen: PMID:24623306
• Das Protein wird vom LZTR1-Adaptor erkannt, was zu seiner Ubiquitinierung und Degradation über einen BCR (BTB-CUL3-RBX1) E3-Ubiquitin-Protein-Ligase-Komplex führt (PubMed:40934300). Zugehörige Referenzen: PMID:40934300
• Subzellulär ist KRAS mit der Zellmembran, dem Endomembransystem und dem Zytoplasma assoziiert.
• Auf Proteinebene wird KRAS in der gesamten Epidermis exprimiert, mit schwacher Expression im Stratum corneum und der Dermis.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Methylierung, Prenylierung, Palmitoylierung und Ubiquitinierung, die seine Lokalisation und Funktion regulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen deckt die Aminosäuren 30–188 innerhalb der konservierten GTPase-Domäne ab; die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte ergibt sich aus der hohen Sequenzidentität in dieser Region. Wenn Sie weitere Arten testen möchten, gleichen Sie die Sequenzen vorher aus.
• Erwarten Sie für das Western Blotting eine Bande um 22 kDa. Verwenden Sie KO-validierte Zelllysate als Negativkontrolle, um die Spezifität der Bande zu bestätigen, und titrieren Sie den Antikörper für optimale Signal-Rausch-Verhältnisse in Ihrem System.
• Bei der Immunfluoreszenz/Immuncytochemie lokalisiert sich KRAS an Membranen und im Zytoplasma; optimieren Sie Fixierungs- und Permeabilisierungsschritte. Fügen Sie KO-Zelllinien hinzu, um die Spezifität der Färbung zu überprüfen.
• Für den ELISA validieren Sie den Antikörper unter Ihren spezifischen Versuchsbedingungen, da die Leistung je nach Beschichtungs- und Nachweismethode variieren kann.

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