[KO validiert] Monoklonaler Anti-Ki67-Antikörper für WB, IF/ICC, IHC-P, mIHC, ELISA – P46013

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Ki67

• Ki-67, kodiert durch das MKI67-Gen, ist auch bekannt als KIA, MIB-1 und PPP1R105. Es ist ein großes (~359 kDa) prolinreiches Kernprotein, das als universeller Proliferationsmarker dient.
• Erforderlich, um einzelne mitotische Chromosomen, die nach dem Abbau der Kernhülle im Zytoplasma verteilt vorliegen, zu stabilisieren; wirkt sowohl als Chromosomen-Repellent während der frühen Mitose als auch als Chromosomen-Attraktant während der späten Mitose. Verwandte Referenzen: PMID:27362226 PMID:32879492 PMID:35513709
• Während der frühen Mitose relokalisiert es an die Chromosomenoberfläche und bildet ausgedehnte bürstenartige Strukturen, die eine sterische und elektrostatische Barriere bilden. Es fungiert als Tensid, das Chromosomenaggregation verhindert und unabhängige Beweglichkeit ermöglicht. Verwandte Referenzen: PMID:27362226
• Während der Anaphase kollabieren die Bürsten und Ki-67 wechselt zur Funktion als Chromosomen-Attraktant: Dephosphorylierung legt eine basische Gruppe frei, die eine RNA-abhängige flüssig-flüssig-Phasentrennung antreibt, um Chromosomen zu aggregieren und große Partikel aus dem neu entstehenden Kern auszuschließen. Verwandte Referenzen: PMID:32879492 PMID:39153474 PMID:28935370
• Bindet DNA mit einer Präferenz für supercoilierte und AT-reiche Sequenzen, was möglicherweise zur Chromatinorganisation beiträgt. Verwandte Referenzen: PMID:10878551 PMID:24867636
• Lokalisiert während des Zellzyklus an Chromosomen, im Kern und im Nukleolus.
• Das Protein unterliegt Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung, die seine dynamische Lokalisierung und Funktion regulieren.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Für Western Blotting ist Ki-67 ein Protein mit hohem Molekulargewicht (~359 kDa); verwenden Sie ein Gel mit niedrigem Prozentsatz (z. B. 6 % SDS-PAGE) und verlängerte Transferzeiten, um eine effiziente Detektion zu gewährleisten.
• Validieren Sie den Antikörper in Ihrem spezifischen experimentellen System, da die Ki-67-Expression streng zellzyklusabhängig ist und zwischen Zelltypen und Proliferationszuständen variieren kann.
• Für IHC-Paraffinschnitte werden Standard-Antigenreparaturmethoden (hitzeinduziert, pH 6 oder 9) empfohlen; erwarten Sie eine Kern- oder Nukleolusfärbung in proliferierenden Zellen.
• Das Immunogen (Aa 1200-1300) kartiert auf die C-terminale Region von humanem Ki67; berücksichtigen Sie eine Sequenzalignment, wenn eine Kreuzreaktivität mit anderen Spezies beabsichtigt ist, da der Antikörper konservierte Epitope erkennen kann.

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