[KO validiert] Anti-IRF3 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB - Q14653

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: IRF3-Funktion und -Lokalisierung

• IRF3 ist ein Schlüssel-Transkriptionsregulator von Typ-I-Interferon (IFN)-abhängigen Immunantworten und spielt eine kritische Rolle bei der angeborenen Immunabwehr gegen DNA- und RNA-Viren. Verwandte Referenzen: PMID:22394562 PMID:24049179 PMID:25636800
• In nicht infizierten Zellen befindet sich IRF3 in inaktiver Form im Zytoplasma. Nach viraler Infektion oder Toll-like-Rezeptor (TLR)-Signalisierung wird es durch die Kinasen IKBKE und TBK1 phosphoryliert, was eine Dimerisierung und den Transport in den Zellkern auslöst. Verwandte Referenzen: PMID:22394562 PMID:25636800 PMID:27302953
• Aktiviertes IRF3 assoziiert mit dem CREB-bindenden Protein (CREBBP), um den dsRNA-aktivierten Faktor-1-Komplex (DRAF1) zu bilden, der an Interferon-stimulierte Response-Elemente (ISRE) bindet und die Transkription von Typ-I-IFN und Interferon-stimulierten Genen (ISGs) antreibt. Verwandte Referenzen: PMID:16154084 PMID:27302953 PMID:33440148
• IRF3 kann über TOMM70:HSP90AA1 zu den Mitochondrien rekrutiert werden, wobei es einen Apoptosekomplex bildet, der den programmierten Zelltod als Reaktion auf bestimmte virale Infektionen induziert. Verwandte Referenzen: PMID:25609812
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst Zytoplasma, Zellkern und Mitochondrium. IRF3 wechselt je nach Aktivierungsstatus zwischen den Kompartimenten.
• Wird konstitutiv in einer Vielzahl von Geweben exprimiert und gewährleistet so eine breite antivirale Überwachung.
• Posttranslationale Modifikationen wie Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitinierung regulieren die IRF3-Aktivität, -Stabilität und die Interaktion mit anderen Proteinen.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, die die IRF3-Funktion in verschiedenen zellulären Kontexten potenziell modulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Der Antikörper richtet sich gegen ein Epitop innerhalb der Aminosäuren 50–150 von humanem IRF3; überprüfen Sie die Spezifität mithilfe der KO-validierten Produktlinie oder durch Knockdown/Knockout in Ihrem experimentellen System.
• Für den Western Blot ist ein Band bei ca. 47 kDa zu erwarten. Verwenden Sie positive Kontrollen wie virusinfizierte oder mit Poly(I:C) stimulierte Zelllysate, um die Detektion von endogenem IRF3 zu verbessern.
• In ELISA-Anwendungen sollten Sie testen, ob der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz in Kombination mit einem passenden IRF3-Antikörperpaar verwendet werden kann, und dies mit rekombinantem IRF3-Protein validieren.
• Da IRF3 in der angeborenen Immunität funktioniert, aktivieren Sie die Signalwege mit Liganden wie Poly(I:C) oder Sendai-Virus, um die Phosphorylierung und den Transport in menschlichen oder murinen Modellen zu untersuchen.

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