[KO Validiert] Anti-IDH1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IP, ELISA - O75874

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: IDH1-Funktion und -Lokalisierung

• IDH1 kodiert die zytoplasmatische NADP-abhängige Isocitrat-Dehydrogenase (IDH1), auch bekannt als IDPc oder Oxalosuccinat-Decarboxylase, die die oxidative Decarboxylierung von Isocitrat zu α-Ketoglutarat katalysiert unter gleichzeitiger Produktion von NADPH (PubMed:10521434, PubMed:19935646).
  Verwandte Referenzen: PMID:10521434 PMID:19935646
• Das Enzym benötigt zweiwertige Metallionen wie Mg²⁺ oder Mn²⁺ als Kofaktoren und gehört zur Familie der Isocitrat/Isopropylmalat-Dehydrogenasen mit wichtigen Rollen im Zitronensäurezyklus und der zellulären Redox-Homöostase.
• IDH1 ist vorwiegend im Zytoplasma und Zytosol lokalisiert und findet sich auch in Peroxisomen, wo es NADPH für peroxisomale Reaktionen wie die Phytanoyl-CoA-Dioxygenase-Aktivität liefern kann.
• Durch die Produktion von NADPH unterstützt IDH1 die reduktive Biosynthese, einschließlich der Lipidsynthese, und hilft dabei, die zelluläre reduzierende Umgebung gegen oxidativen Stress aufrechtzuerhalten.
• Das Protein unterliegt posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Acetylierung und Phosphorylierung, die seine enzymatische Aktivität und subzelluläre Verteilung modulieren können.
• IDH1 kann als Hornhautepithel-Crystallin fungieren und möglicherweise zur Aufrechterhaltung der Hornhauttransparenz beitragen (nach Homologie).
• Das berechnete Molekulargewicht des reifen IDH1-Monomers beträgt ca. 46,7 kDa, was mit der beobachteten Bande um 47 kDa beim Western Blotting übereinstimmt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst das全长 humane IDH1-Protein (aa 1–414), was darauf hindeutet, dass der Antikörper sowohl native als auch denaturierte Konformationen erkennen kann. Für Western Blotting sollte eine Bande in der Nähe von 47 kDa beobachtet werden; validieren Sie dies mit geeigneten positiven und negativen Kontrollen, da dieser Antikörper KO-validiert ist.
• Bei der Immunpräzipitation (IP) verwenden Sie ein Standardprotokoll mit Zelllysaten aus IDH1-exprimierenden Geweben oder Zelllinien. Bestätigen Sie die Erfassung durch Western Blotting mit einem anderen Antikörper oder durch Massenspektrometrie.
• Für die Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) ist vorwiegend ein zytoplasmatisches Färbemuster mit möglichen peroxisomalen Punkten zu erwarten. Fügen Sie geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen hinzu und verifizieren Sie die Spezifität unter Verwendung von IDH1-Knockout-Kontrollzellen, falls verfügbar.
• Dieser Antikörper kreuzreagiert mit murinem und rattigem IDH1, was ihn für Studien in Nagetiermodellen geeignet macht. Validieren Sie immer die Expressionsniveilen im spezifischen Gewebe oder Zellsystem, das untersucht wird.
• Für ELISA sollten Sie die Paarung mit einem passenden Detektionsantikörper in Betracht ziehen oder den Antikörper sowohl als Erfassungs- als auch als Detektionsantikörper in einem Sandwich-Format verwenden, um eine minimale Kreuzreaktivität mit anderen Isocitrat-Dehydrogenase-Isoformen (z. B. IDH2, IDH3) sicherzustellen.

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