[KO-validiert] Anti-Hexokinase-1 (HK1) monoklonaler Kaninchen-Antikörper für WB, IP, IHC-P, ELISA - P19367

Wichtige Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der Hexokinase-1

• Hexokinase-1 (HK1, auch bekannt als Gehirn-Hexokinase, HK I, HK-A) ist ein ca. 102 kDa schweres glykolytisches Enzym, das die Phosphorylierung von Hexosen, primär Glukose, zu Glukose-6-Phosphat im ersten Schritt der Glykolyse katalysiert.
• HK1 ist essenziell für den Glukosestoffwechsel und phosphoryliert D-Glukose, D-Glukosamin, D-Fruktose, D-Mannose und 2-Desoxy-D-Glukose, jedoch nicht N-Acetyl-D-Glukosamin (PubMed:1637300, PubMed:25316723, PubMed:27374331). Zugehörige Referenzen: PMID:1637300 PMID:25316723 PMID:27374331
• Über seine metabolische Rolle hinaus fungiert HK1 als Mustererkennungsrezeptor für bakterielles Peptidoglykan; zytosolisches N-Acetyl-D-Glukosamin aus Peptidoglykan hemmt seine Hexokinase-Aktivität und löst die Dissoziation von der mitochondrialen Außenmembran aus, was zur Aktivierung des NLRP3-Inflammasoms und zu angeborenen Immunantworten führt (PubMed:27374331). Zugehörige Referenzen: PMID:27374331
• HK1 lokalisiert sich überwiegend an der mitochondrialen Außenmembran, mit einem kleineren Pool im Zytosol. Diese Bindung koppelt die Glykolyse an die mitochondriale ATP-Produktion und beeinflusst metabolische Signalwege.
• Durch alternatives Spleißen existieren mehrere Isoformen von HK1: Isoform 1 ist weit verbreitet, Isoform 2 ist Erythrozyten-spezifisch, und die Isoformen 3 und 4 sind Hoden-spezifisch (PubMed:10978502). Zugehörige Referenzen: PMID:10978502
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Acetylierung und Phosphorylierung, die seine Aktivität und subzelluläre Lokalisierung regulieren können. HK1 ist zudem ein allosterisches Enzym und eine ATP-bindende Kinase.
• Mutationen in HK1 werden mit Krankheiten wie der Charcot-Marie-Tooth-Krankheit, hereditärer hämolytischer Anämie, geistiger Behinderung und Retinitis pigmentosa in Verbindung gebracht, was seine kritische physiologische Bedeutung unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 50–150 der humanen Hexokinase-1 entspricht, einer Region, die speziesübergreifend konserviert sein kann. Anwender, die mit Maus- oder Rattenproben arbeiten, sollten die Kreuzreaktivität in ihrem Modellsystem überprüfen.
• Für den Western Blot wird eine Bande bei etwa 102 kDa erwartet; ziehen Sie die Verwendung reduzierender Bedingungen und geeigneter Ladekontrollen für mitochondriale Proteine in Betracht.
• Beachten Sie bei Immunpräzipitations- und Immunfluoreszenzanwendungen, dass HK1 primär an der mitochondrialen Außenmembran lokalisiert ist; Permeabilisierung und Organellenanreicherung können den Nachweis verbessern.
• Für die Immunhistochemie (IHC) sollten Antigen-Retrieval-Bedingungen und Fixierungsmethoden für mitochondriale Antigene optimiert werden. Titrieren Sie den Antikörper in den relevanten Gewebetypen.
• Der Antikörper ist für ELISA geeignet; bei der Entwicklung quantitativer Assays sollten geeignete Standards verwendet und die Linearität sowie Sensitivität in der spezifischen Probenmatrix validiert werden.

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