KO-validierter polyklonaler Anti-GIT1-Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – Q9Y2X7

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von GIT1

• GIT1 (ARF-GTPase-aktivierendes Protein GIT1), auch bekannt als p95-APP1 und CAT1, ist ein Gerüstprotein mit mehreren Domänen, das an der Rezeptorinternalisierung, der Umgestaltung fokaler Adhäsionen sowie an der Signalübertragung durch G-Protein-gekoppelte Rezeptoren und Rezeptor-Tyrosinkinasen beteiligt ist.
• Durch die Aktivierung von PAK1 reguliert GIT1 positiv die Mikrotubuli-Nukleation während der Interphase und spielt über einen an ENTR1 und PTPN13 beteiligten Signalweg eine Rolle bei der Zytokinese.
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:27012601, PMID:23108400
• GIT1 fördert die Zellmotilität durch die Regulation der Dynamik fokaler Komplexe und die lokale Aktivierung von RAC1. Außerdem rekrutiert es MAPK1/3/ERK1/2 nach EGF-Stimulation zu fokalen Adhäsionen und stimuliert dadurch die Zellmigration.
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:10938112, PMID:11896197, PMID:15923189
• GIT1 ist entscheidend für die Morphogenese dendritischer Dornen und die Synapsenbildung. In Hippocampusneuronen rekrutiert es ARHGEF7/Beta-PIX, um RAC1 lokal zu aktivieren, was für die Morphogenese dendritischer Dornen und die Synapsenbildung essenziell ist. Außerdem reguliert es die synaptische Stabilität von GABA(A)-Rezeptoren durch die Koordination der RAC1- und PAK1-Aktivität, was zur Stabilisierung von F-Aktin und zur Aufrechterhaltung der inhibitorischen synaptischen Übertragung führt.
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:12695502, PMID:15800193, PMID:25284783
• GIT1 ist für die VEGF-Signalübertragung durch die Aktivierung der Phospholipase C-gamma und von ERK1/2 essenziell und steuert dadurch die Proliferation von Endothelzellen und die Angiogenese. Es wird außerdem für die Knochenregeneration benötigt, teilweise durch die Regulation der NF-kappa-B-Signalübertragung in mesenchymalen Stammzellen zur Steigerung der VEGFA-Produktion.
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:19273721, PMID:31502302
• Subzelluläre Lokalisation: GIT1 befindet sich im Zytoplasma, an Synapsen (prä- und postsynaptisch), in der postsynaptischen Dichte, an fokalen Adhäsionen, im Lamellipodium, im Zentrosom und am Spindelpol.
• Strukturelle Merkmale: Enthält ANK-Wiederholungen, eine Coiled-Coil-Domäne und einen Zinkfinger; unterliegt alternativem Spleißen und Phosphorylierung.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 460–640 des humanen GIT1, einer zentralen Region, die konservierte Epitope über bekannte Isoformen und Spezies hinweg erkennen kann.
• Für den Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 84 kDa; aufgrund von alternativem Spleißen oder posttranslationalen Modifikationen können zusätzliche Banden auftreten. Validieren Sie den Antikörper im relevanten Probensystem.
• Für Immunfluoreszenz/ICC sollten Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen in Betracht gezogen werden, die für Zytoskelett- und fokale Adhäsionsstrukturen geeignet sind; eine Ko-Färbung mit Markern für F-Aktin oder Proteine fokaler Adhäsionen kann aufschlussreich sein.
• ELISA-Anwendungen können eine Optimierung des Beschichtungsantigens und der Antikörperverdünnung erfordern, um die gewünschte Sensitivität und Spezifität zu erreichen.
• Eine Kreuzreaktivität mit GIT1 von Maus und Ratte wird durch die Daten des Anbieters unterstützt; die endogenen Expressionsniveaus und gewebespezifischen Isoformen sollten jedoch experimentell überprüft werden.

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