KO-validierter Anti-EHMT2 polyklonaler Antikörper für WB, IP, ELISA - Q96KQ7

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: EHMT2-Funktion und -Lokalisierung

• EHMT2, auch bekannt als G9a, BAT8 oder KMT1C, ist eine Histon-Lysin-N-Methyltransferase, die vom EHMT2-Gen (Gen-ID: 10919) kodiert wird und zur Familie der SET-Domänen-Methyltransferasen gehört.
• Es wirkt als euchromatische H3K9 Mono- und Dimethyltransferase (H3K9me1/H3K9me2), erzeugt eine repressive epigenetische Markierung, die von HP1-Proteinen erkannt wird, um die Transkription zu unterdrücken. Verwandte Referenzen: PMID:11316813 PMID:20084102
• EHMT2 monomethyliert auch Histon H3 an Lys-56 (H3K56me1) während der G1-Phase und erleichtert so die PCNA-Interaktion und DNA-Replikation. Verwandte Referenzen: PMID:22387026
• Es methyliert schwach H3K27 und modifiziert Histon H1.4 an Lys-26, wodurch sein Histon-Substratrepertoire erweitert wird. Verwandte Referenzen: PMID:11316813 PMID:19144645
• Über Histone hinaus methyliert EHMT2 Nicht-Histon-Substrate, einschließlich p53 (Lys-373), CDYL, WIZ, DNMT1 und HDAC1, und unterzieht sich einer Automethylierung. Verwandte Referenzen: PMID:20118233 PMID:18438403
• Das Protein wird für die DNA-Methylierung benötigt, unabhängig von seiner Histon-Methyltransferase-Aktivität.
• EHMT2 lokalisiert im Zellkern und an Chromosomen, was mit seiner Rolle bei der Chromatinregulation übereinstimmt.
• Es ist weit verbreitet exprimiert, mit den höchsten Konzentrationen in fetaler Leber, Thymus, Lymphknoten, Milz und peripheren Blutleukozyten.
• Strukturell enthält EHMT2 Ankyrin-Wiederholungen, eine SET-Domäne und Zinkfinger-Motive, was es als metallbindende, S-Adenosyl-L-Methionin-abhängige Methyltransferase klassifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 877–1176 (C-terminale Region) von humanem EHMT2; erwägen Sie, die Reaktivität in Ihrem spezifischen Modellsystem zu überprüfen, da Epitope zwischen Spezies oder Isoformen konserviert sein können.
• Für den Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 132 kDa; verwenden Sie einen Hochbereichs-Molekulargewichtsmarker und einen geeigneten Gelprozentsatz (z.B. 8% SDS-PAGE) für eine optimale Auflösung.
• Testen Sie bei der Immunpräzipitation die Antikörperkonzentration und Inkubationsbedingungen (z.B. 1–2 µg pro 500 µg Lysat), um die Einfangseffizienz zu optimieren und den Hintergrund zu reduzieren.
• Für ELISA beschichten Sie das Antigen mit 1–10 µg/mL und titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Arbeitsverdünnung zu bestimmen; schließen Sie geeignete Negativkontrollen ein.
• Der Lieferant berichtet von einer Knockout-Validierung für diesen Antikörper, was seine Spezifität für den Nachweis von endogenem EHMT2 unterstützt; bestätigen Sie bei Bedarf die Zielidentität durch siRNA-Knockdown oder Knockout-Zelllinien.

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