KO-validiertes Anti-DNAJB1 polyklonales Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P25685

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: DNAJB1-Funktion und -Lokalisierung

• DNAJB1 (DnaJ-Homolog Subfamilie B Mitglied 1), auch bekannt als Hdj1, HSP40, HSPF1 oder Sis1, ist ein Mitglied der DnaJ/HSP40-Chaperon-Familie. Alternatives Spleißen kann mehrere Isoformen erzeugen.
• Es fungiert als Co-Chaperon, das mit HSP70 interagiert und dessen ATPase-Aktivität stimuliert, um die Proteinfaltung zu fördern. Verwandte Referenzen: PMID:14503850
• Zusammen mit TTC1 wirkt DNAJB1 als Chaperon-Adapter und reguliert die HSP70-abhängige Faltung durch Bindung an die HSP70-Aminoterminus-Region.
• DNAJB1 reguliert die Hitzeschock-induzierte HSF1-Transkriptionsaktivität während der Abschwächungs- und Erholungsphasen der Hitzeschockantwort negativ. Verwandte Referenzen: PMID:9499401
• Es stimuliert die ATP-Hydrolyse und die Wiederfaltung denaturierter Proteine durch HSPA1A/B in vitro. Verwandte Referenzen: PMID:24318877
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst das Zytoplasma, den Zellkern und den Nukleolus, was seine Rollen sowohl in der Chaperon-vermittelten Faltung als auch in der stressresponsiven Transkriptionsregulation widerspiegelt.
• DNAJB1 ist ein Phosphoprotein, wobei posttranslationale Modifikationen möglicherweise seine Aktivität und Interaktionen modulieren.
• Als stressinduzierbares Chaperon ist DNAJB1 entscheidend für die zelluläre Proteostase, insbesondere unter Bedingungen, die die Proteinfaltungshomöostase herausfordern.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 1‑340 von humanem DNAJB1 und deckt das Voll-Längen-Protein ab, was die Erkennung mehrerer Isoformen und konservierter Epitope ermöglichen kann.
• Für Western Blotting (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht von DNAJB1 etwa 38 kDa; ziehen Sie die Verwendung einer geeigneten Ladekontrolle in Betracht und verifizieren Sie die Bandenspezifität mit Knockout-validierten Lysaten.
• Bei Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) sind sowohl zytoplasmatische als auch nukleare/nukleoläre Färbemuster zu erwarten; optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen, um die Epitopzugänglichkeit zu erhalten.
• Führen Sie bei der Durchführung von ELISA eine Titration des Antikörpers durch, um optimale Beschichtungs- und Detektionskonzentrationen zu bestimmen; validieren Sie die Reaktivität mit rekombinantem DNAJB1 oder Zelllysaten von Mensch, Maus oder Ratte.
• Da DNAJB1 ein stressinduzierbares Protein ist, können die Expressionsniveaus variieren; induzieren Sie Hitzeschock oder andere Stressoren in Ihrem Modellsystem, um das Signal bei Bedarf zu verstärken.

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