KO-validiertes Anti-cIAP1 Kaninchen-Monoklonalantikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q13490

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: cIAP1-Funktion und -Lokalisierung

• Das Baculoviral IAP Repeat-containing Protein 2 (cIAP1, auch bekannt als BIRC2, API1, MIHB, HIAP2 und RNF48) ist ein multifunktionales Protein, das zur Familie der Inhibitoren der Apoptose (IAP) gehört. Es ist durch das Vorhandensein von Baculoviral IAP Repeat (BIR)-Domänen und einer C-terminalen RING-Finger-Domäne gekennzeichnet, die E3-Ubiquitin-Ligase-Aktivität verleiht.
• cIAP1 ist ein Schlüsselregulator der Apoptose und der inflammatorischen Signalgebung und moduliert sowohl den kanonischen als auch den nicht-kanonischen NF-kappa-B-Weg. Es wirkt als E3-Ubiquitin-Ligase für verschiedene Substrate, einschließlich RIPK1, CASP3, CASP7, TRAF2, NIK und IKBKG, und steuert so das Zellüberleben und die Immunantworten.
• Über die Apoptose hinaus nimmt cIAP1 an mitogener Kinase-Signalgebung, Zellproliferation, Invasion und Metastasierung teil. Es kann die transkriptionelle Aktivität von E2F1 stimulieren und spielt eine Rolle beim Zellzyklusfortschritt.
• Das Protein ist auch an der angeborenen Immunität beteiligt durch die Regulation von Pattern-Recognition-Rezeptoren (PRRs) wie Toll-like-Rezeptoren (TLRs), Nod-like-Rezeptoren (NLRs) und RIG-I-like-Rezeptoren (RLRs), was es mit der Pathogenerkennung und der Produktion von inflammatorischen Zytokinen verbindet.
• cIAP1 unterdrückt die spontane Bildung des Ripoptosoms, eines großen Komplexes, der sowohl kaspaseabhängigen als auch -unabhängigen Zelltod induzieren kann, durch Ubiquitinierung von RIPK1 und CASP8.
• Zur subzellulären Lokalisierung gehören sowohl das Zytoplasma als auch der Zellkern, wodurch cIAP1 die Interaktion mit diversen Signalkomplexen in verschiedenen Kompartimenten ermöglicht.
• Die Expression wird in vielen fetalen und adulten Geweben nachgewiesen, mit den höchsten Werten in Skelettmuskel, Thymus, Hoden, Eierstöcken und Bauchspeicheldrüse sowie niedriger oder fehlender Expression im Gehirn und in peripheren Blutzellen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 1–100 von humanem cIAP1 (UniProt Q13490) entspricht. Es wird vorhergesagt, dass der Antikörper im Western Blot eine Bande bei ~70 kDa detektiert.
• Für WB sollten Sie in Betracht ziehen, Ganzzelllysate von HeLa oder anderen humanen Zelllinien mit bestätigter endogener Expression als positive Kontrollen zu verwenden. Eine Kreuzreaktivität mit Ratte wurde berichtet; überprüfen Sie die Leistung in Ihrem spezifischen Ratten-Probensystem.
• Für IHC-P wird eine Optimierung der Antigen-Retrieval und der Antikörperverdünnung empfohlen. Fügen Sie geeignete positive Gewebekontrollen wie Skelettmuskel oder Thymus hinzu.
• Für ELISA kann dieser monoklonale Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz dienen; Kombinieren Sie ihn mit einem anderen Klon, um Epitop-Interferenzen zu vermeiden.
• Da cIAP1 eine an mehreren Wegen beteiligte E3-Ligase ist, sollten Sie die Verwendung geeigneter Inhibitoren (z. B. Proteasom-Inhibitoren) oder Stimulationsbedingungen in Betracht ziehen, um die Expression bei der Funktionsbewertung zu stabilisieren.

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