[KO validiert] Anti-CDKN2A/p16INK4a Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P42771 / Q8N726

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: CDKN2A/p16INK4a Funktion und Lokalisierung

• CDKN2A kodiert den Cyclin-abhängigen Kinase-Inhibitor 2A, auch bekannt als p16INK4a, multipler Tumorsuppressor 1 (MTS-1) und CDK4I. Es fungiert als negativer Regulator des Zellzyklusfortschritts durch Hemmung von CDK4 und CDK6, wodurch die Phosphorylierung des Retinoblastom-Proteins verhindert wird.
• Das Protein lokalisiert sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern, was seiner Rolle bei der Kontrolle des Zellzykluseintritts entspricht.
• CDKN2A ist weitgehend in normalen Geweben exprimiert, mit Ausnahmen einschließlich Gehirn und Skelettmuskel. Isoform 3 zeigt eine pankreasspezifische Expression.
• p16INK4a ist ein Tumorsuppressor, der häufig in verschiedenen Krebsarten mutiert oder gelöscht ist, einschließlich des Li-Fraumeni-Syndroms, was seine kritische Rolle bei der Aufrechterhaltung der genomischen Stabilität unterstreicht.
• Das Protein unterliegt post-translationalen Modifikationen wie Acetylierung und Phosphorylierung, die seine Aktivität und Stabilität regulieren können.
• p16INK4a enthält ANK-Wiederholungsmotive, die Protein-Protein-Interaktionen erleichtern, die für seine hemmende Funktion auf CDK4/6 essentiell sind.
• Funktionelle Studien zeigen, dass die Induktion von p16INK4a zu einem Zellzyklusarrest in der G1-Phase führt, was seine Bedeutung für Zellalterung und Tumorsuppression hervorhebt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 1–156 von humanem p16INK4a (NP_000068.1) entspricht. Für Western Blotting sollten Sie Ganzzelllysate von humanen Zelllinien in Betracht ziehen, von denen bekannt ist, dass sie CDKN2A exprimieren. Da das Produkt KO-validiert ist, wird empfohlen, ein CDKN2A-Knockout-Kontrolllysat einzubeziehen, um die Bandspezifität zu bestätigen.
• Das vorhergesagte Molekulargewicht von p16INK4a beträgt ca. 16 kDa, obwohl mehrere Isoformen (8–17 kDa) aufgrund von alternatives Spleißen und post-translationalen Modifikationen nachgewiesen werden können. Optimieren Sie den Gelanteil und die Transferbedingungen für Proteine mit niedrigem Molekulargewicht.
• Für die Immunfluoreszenz (IF/ICC) werden eine geeignete Fixierung (z. B. 4 % Paraformaldehyd) und Permeabilisierung (z. B. 0,1 % Triton X-100) empfohlen. p16INK4a lokalisiert sowohl im Kern als auch im Zytoplasma, daher sollte die Bildgebung die gesamte Zelle abdecken.
• In ELISA-Anwendungen kann der Antikörper nach Validierung gegen das Zielantigen als Erfassungs- oder Nachweisreagenz verwendet werden. Stellen Sie einen geeigneten Beschichtungspuffer und Blockierungsschritte für ein optimales Signal sicher.

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