[KO validiert] Anti-CDKN1A/p21 Kaninchen-Monoklonalantikörper für WB, IHC-P, ELISA - P38936

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: CDKN1A/p21 Funktion und Lokalisierung

• CDKN1A/p21, auch bekannt als CIP1, WAF1, SDI1, MDA-6 und CAP20, ist ein Schlüsselinhibitor für cyclin-abhängige Kinasen, der an der Regulierung des Zellzyklus beteiligt ist.
• Es spielt eine kritische Rolle bei der Kontrolle des Zellzyklusfortschritts und der durch DNA-Schäden induzierten G2-Arrestierung und vermittelt eine p53/TP53-abhängige und unabhängige (über CREB3L1) Hemmung der Proliferation. Verwandte Referenzen: PMID:9106657
• CDKN1A bindet und hemmt die Aktivität cyclin-abhängiger Kinasen, verhindert die Phosphorylierung kritischer Substrate und blockiert so den Zellzyklusfortschritt. Es moduliert auch die Assembly und Kinaseaktivität des Cyclin-D-CDK4-Komplexes in einer dosisabhängigen Weise.
• Das Protein hemmt die DNA-Synthese, indem es mit POLD3 um die PCNA-Bindung konkurriert und die Funktion der DNA-Polymerase delta stört. Verwandte Referenzen: PMID:11595739
• In Keratinozyten reguliert es negativ die CDK4/6-getriebene Phosphorylierung von RB1, was zur Freisetzung von E2F1 und der Transkription von Genen der G1/S-Phase führt.
• CDKN1A ist sowohl im Zellkern als auch im Zytoplasma lokalisiert und wird in adulten Geweben ubiquitär exprimiert, wobei im Gehirn besonders niedrige Spiegel zu beobachten sind.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitinierung; es verfügt über eine Zinkfingerdomäne zur Metallbindung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die N-terminale Region (aa 1-164), welche die CDK- und PCNA-Bindedomänen enthält, wodurch dieser Antikörper ein Kandidat zum Nachweis funktionaler Interaktionen ist.
• Für WB beachten Sie, dass p21 bei etwa 18-21 kDa wandert; Ladekontrollen wie GAPDH oder β-Actin werden empfohlen.
• Validieren Sie die Reaktivität in Maus- und Rattenproben, da eine Kreuzreaktivität berichtet wird; bestätigen Sie die Bandspezifität in der Spezies von Interesse.
• Für IHC-P optimieren Sie die Antigen-Retrieval und die Antikörperverdünnung; sowohl nukleäre als auch zytoplasmatische Färbungen können beobachtet werden.
• ELISA-Anwendungen erfordern möglicherweise eine Titration des Antikörpers und des Antigens, um ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis zu erzielen.

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