[KO validiert] Anti-CD133 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IP, ELISA - O43490

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Prominin-1

• Prominin-1 (auch bekannt als AC133, CD133) ist ein transmembranes Glykoprotein, das vom PROM1-Gen kodiert wird; alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen mit unterschiedlichen Gewebeverteilungen.
• Es ist an Zelldifferenzierung, Proliferation und Apoptose beteiligt. Zugehörige Referenzen: PMID:24556617
• Das Protein bindet Cholesterin in Mikrodomänen der Plasmamembran und trägt zur Organisation der apikalen Plasmamembran in Epithelzellen bei.
• Während der frühen Netzhautentwicklung wirkt Prominin-1 als Schlüsselregulator der Scheibenmorphogenese, was seine Bedeutung für die Struktur der Photorezeptoren unterstreicht.
• In Neuroblastomzellen unterdrückt es die neuronale Differenzierung (Neuritenwachstum) auf RET-abhängige Weise. Zugehörige Referenzen: PMID:20818439
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst die apikale Zellmembran, Mikrovilli, Zilien, äußere Segmente der Photorezeptoren und das intermediale Kompartiment von Endoplasmatischem Retikulum und Golgi-Apparat.
• Isoform 1 ist ein etablierter Marker für CD34+ hämatopoetische Stamm- und Vorläuferzellen, während Isoform 2 überwiegend in fötaler Leber, Skelettmuskel, Niere, Herz und erwachsenem Pankreas, Niere, Leber, Lunge und Plazenta exprimiert wird.
• Es wurden posttranslationale Modifikationen wie Acetylierung, Phosphorylierung und Glykosylierung identifiziert, die seine Funktion und sein Molekulargewicht in Assays beeinflussen können.
• Mutationen in PROM1 sind mit erblichen Netzhautdystrophien verbunden, darunter Zapfen-Stäbchen-Dystrophie, Retinitis pigmentosa und Stargardt-Krankheit.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen (AA 179–433) zielt auf die extrazelluläre Domäne ab, was wahrscheinlich vorteilhaft für die Oberflächenmarkierung bei IF/ICC ist; sorgen Sie für optimale Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen für Studien zur zellulären Lokalisierung.
• Beachten Sie für Western Blot, dass CD133 stark glykosyliert ist; die theoretische Masse beträgt ~97 kDa, aber die beobachtete Bande kann höher wandern. Verwenden Sie reduzierende/denaturierende Bedingungen und validieren Sie mit einer Positivkontrolle (z. B. Stammzellen) zusammen mit der bereitgestellten KO-valiierten Negativkontrollstrategie.
• Bei der Durchführung der Immunpräzipitation werden milde Lysepuffer empfohlen, die die Integrität von Membranproteinen erhalten, und die Antikörperkonzentration sollte für jedes experimentelle System optimiert werden.
• Für ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz evaluiert werden; erwägen Sie die Paarung mit einem passenden Detektionsantikörper und die Validierung mit rekombinantem CD133-Protein.
• Als Kaninchen-polyclonaler Antikörper ist eine Charge-to-Charge-Variabilität möglich; es ist gute Praxis, jede neue Charge für die vorgesehene Anwendung zu titrieren und die Spezifität in der relevanten Probenmatrix zu bestätigen.

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