[KO Validiert] Anti-ATG4A Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q8WYN0

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ATG4A-Funktion und -Lokalisierung

• ATG4A ist eine Cysteinprotease, die eine Schlüsselrolle in der Autophagie spielt, indem sie sowohl die proteolytische Aktivierung als auch die Delipidierung von ATG8-Familienproteinen vermittelt. Verwandte Referenzen: PMID:12473658, PMID:15169837, PMID:17347651
• Sie spaltet die C-terminale Aminosäure von ATG8-Proteinen (z. B. MAP1LC3A, GABARAP, GABARAPL2) ab, um einen Glycinrest freizulegen, was ihre Konjugation an Phosphatidylethanolamin (PE) und die Membraneinlagerung ermöglicht. Verwandte Referenzen: PMID:12473658, PMID:15169837, PMID:17347651
• ATG4A fungiert auch als ein deubiquitinierendes Enzym, das ATG8 aus Proteinkonjugaten (ATG8ylierung) entfernt und hochmolekulare Addukte entgegenwirkt. Verwandte Referenzen: PMID:31315929, PMID:33773106
• Sie zeigt Delipidierungsaktivität gegenüber PE-konjugierten ATG8-Proteinen, ein entscheidender Recycling-Schritt während der Makroautophagie. Verwandte Referenzen: PMID:29458288, PMID:33909989
• Im Vergleich zu ihrem Homolog ATG4B zeigt ATG4A eine stärkere Delipidierungs-, aber eine schwächere proteolytische Verarbeitungsaktivität. Verwandte Referenzen: PMID:29458288
• Über ihre Proteasefunktion hinaus fördert ATG4A das Wachstum der Phagophore während der Mitophagie durch Regulation des ATG9A-Traffickings und Vermittlung von ER–Phagophor-Kontakten. Verwandte Referenzen: PMID:33773106
• ATG4A lokalisiert sich primär im Zytoplasma.
• Schlüsselwörter: Alternatives Spleißen, Autophagie, Hydrolase, Protease, Proteintransport, Lipidstoffwechsel, Ubl-Konjugationsweg.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der C-terminalen Region (aa 289-398) von humanem ATG4A, was helfen kann, sowohl die Volllänge als auch potenzielle Spleißvarianten zu erkennen, die N-terminale Anteile fehlen.
• Für den Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht 45 kDa; stellen Sie sicher, dass der passende Gelanteil verwendet wird, und verwenden Sie positive Kontrolllysate aus humanen oder murinen Zelllinien.
• ELISA kann unter Verwendung von rekombinantem ATG4A-Protein oder Peptidbeschichtung durchgeführt werden; erwägen Sie eine Checkerboard-Titration, um die Antikörper- und Antigenkonzentrationen zu optimieren.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, sind Chargenunterschiede möglich; validieren Sie jede neue Charge für die beabsichtigte Anwendung.
• Die Knockout-Validierung deutet auf Spezifität hin; fügen Sie KO-Zelllysat als Negativkontrolle im WB hinzu, um die Bandenidentität zu bestätigen.

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