KMT2A polyklonaler Kaninchenantikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q03164

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von KMT2A

• KMT2A (MLL1, ALL-1, HRX) ist die katalytische Untereinheit des MLL1/MLL-Komplexes, einer Histonmethyltransferase, die überwiegend H3K4me1- und H3K4me2-Markierungen in aktiven Chromatinregionen erzeugt und dadurch Transkription und DNA-Reparatur erleichtert. Zugehörige Referenzen: PMID:12453419 PMID:15960975 PMID:19187761
• Das Enzym weist allein eine geringe Methyltransferaseaktivität auf und erfordert für eine vollständige katalytische Kompetenz den Zusammenbau mit anderen Mitgliedern des Kernkomplexes (z. B. WDR5, ASH2L, RBBP5). Zugehörige Referenzen: PMID:19187761 PMID:26886794
• Es bindet an unmethylierte CpG-Inseln in den Promotoren von Zielgenen, erhält deren hypomethylierten Zustand aufrecht und ist entscheidend für die transkriptionelle Aktivierung von HOXA9, einem wichtigen Regulator der Entwicklung. Zugehörige Referenzen: PMID:12453419 PMID:20010842 PMID:20677832
• KMT2A befindet sich überwiegend im Zellkern.
• Es wird in Herz, Lunge, Gehirn sowie T- und B-Lymphozyten exprimiert, was mit seiner Rolle bei Entwicklung und Hämatopoese übereinstimmt.
• Es ist an der zirkadianen Uhr beteiligt, indem es die rhythmische H3K4-Methylierung vermittelt, wodurch ein permissiver Chromatinzustand für die Bindung von CLOCK-BMAL1 hergestellt wird (aufgrund von Ähnlichkeiten).
• Es durchläuft eine Auto-Methylierung an Cys-3882, eine Modifikation, die seine enzymatische Aktivität modulieren kann. Zugehörige Referenzen: PMID:24235145
• KMT2A ist ein Proto-Onkogen, das häufig an chromosomalen Umlagerungen beteiligt ist, die onkogene Fusionsproteine hervorbringen und akute lymphoblastische sowie myeloische Leukämien auslösen.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 2829–2883 nahe dem C-Terminus. Beachten Sie, dass dieser polyklonale Antikörper sowohl das vollständige KMT2A (~432 kDa) als auch bestimmte Isoformen oder proteolytische Fragmente erkennen kann.
• Verwenden Sie für den Western Blot SDS-PAGE-Gele mit niedrigem Prozentsatz (z. B. 6 %), verlängerte Nass-Transferzeiten und fügen Sie dem Lysepuffer Proteaseinhibitoren hinzu, um das große 432-kDa-Protein zu erhalten.
• Bei Immunfluoreszenz/Immunzytochemie ist eine Kernfärbung zu erwarten. Führen Sie eine Doppelfärbung mit einem Kernmarker (z. B. DAPI) durch und validieren Sie die Spezifität anhand von Knock-down- oder Knockout-Kontrollen.
• Für ELISA können standardmäßige indirekte oder Sandwich-Protokolle verwendet werden. Titraten Sie den Antikörper, um die optimalen Arbeitskonzentrationen für Ihr spezifisches Assaysystem zu bestimmen.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus- und Rattenorthologen wurde berichtet. Überprüfen Sie jedoch vor groß angelegten Experimenten die Sequenzhomologie und Reaktivität in Lysaten der relevanten Spezies.

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