[KD Validiert] Kaninchen Anti-TIMM13 Monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q9Y5L4

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: TIMM13-Funktion und -Lokalisation

• TIMM13 kodiert für die mitochondriale Import-Translocase-Untereinheit der inneren Membran Tim13, ein ~10,5 kDa großes Chaperon im mitochondrialen Intermembranraum (UniProt: Q9Y5L4).
• Es wirkt als ein Chaperon-ähnliches Protein, das die Aggregation hydrophober Vorstufen verhindert und sie während des Imports durch den mitochondrialen Intermembranraum führt.
• Zusammen mit TIMM8 bildet es den TIMM8-TIMM13-Komplex, der spezifisch den Import von Multi-Pass-Proteinen der inneren Membran wie TIMM23, SLC25A12/ARALAR1 und SLC25A13/ARALAR2 vermittelt; der verwandte TIMM9-TIMM10-Komplex bearbeitet ein breiteres Substratspektrum.
• Lokalisiert an der mitochondrialen Innenmembran, was mit seiner Rolle in den späteren Stadien der Proteintranslokation übereinstimmt.
• Ubiquitär exprimiert, mit höchsten Konzentrationen in Herz, Niere, Leber und Skelettmuskulatur – Gewebe mit hohem Mitochondriengehalt und Energiebedarf.
• Das Protein unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Acetylierung und Phosphorylierung und enthält konservierte Cysteinreste, die Disulfidbrücken bilden; es bindet auch Zinkionen, was charakteristisch für kleine Tim-Chaperone ist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die N-terminalen 95 Aminosäuren von humanem TIMM13, was darauf hindeutet, dass der Antikörper das native Voll-Längen-Protein erkennt; ziehen Sie für die Erstvalidierung die Verwendung von rekombinantem TIMM13-Protein oder einem positiven Kontrolllysat (z.B. HeLa oder HEK293) in Betracht.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 11 kDa; verwenden Sie ein 15% SDS-PAGE-Gel und optimieren Sie die Transferbedingungen für kleine Proteine, um scharfe Banden zu gewährleisten.
• Bei Immunfluoreszenz/ICC ist eine mitochondriale Färbung zu erwarten; bestätigen Sie die Spezifität durch Co-Färbung mit einem mitochondrialen Marker wie Tom20 oder durch Verwendung von MitoTracker.
• Der Antikörper ist für ELISA validiert; ziehen Sie für Sandwich-ELISA-Anwendungen gegen TIMM13 die Kombination mit einem Fängerantikörper in Betracht und validieren Sie die Spezifität mit rekombinantem Antigen.
• Da die Kreuzreaktivität nur für Human bestätigt ist, testen Sie in humanen Proben und berücksichtigen Sie bei der Versuchsplanung potenzielle speziesspezifische Epitopvariationen.

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