KD-validiertes Anti-TFEB Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P19484

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: TFEB-Funktion und -Lokalisierung

• Transkriptionsfaktor EB ist ein Hauptregulator der Lysosomenbiogenese, Autophagie sowie verwandter metabolischer und Immunprozesse.
  Verwandte Referenzen: PMID:21617040, PMID:22343943, PMID:22576015
• Er bindet an E-Box- und CLEAR-Box-DNA-Motive nach Dimerisierung mit MiT/TFE-Familienmitgliedern wie TFE3 oder MITF.
  Verwandte Referenzen: PMID:1748288, PMID:19556463, PMID:29146937, PMID:22692423
• Nährstoffempfindliche MTOR-Phosphorylierung steuert die subzelluläre Lokalisierung von TFEB: Phosphorylierung hält es im Zytosol zurück, während Dephosphorylierung den Kernimport antreibt.
  Verwandte Referenzen: PMID:21617040, PMID:22343943, PMID:22576015, PMID:22692423
• TFEB fördert die Expression von autophagiezugehörigen Genen und reguliert den autophagen Weg positiv.
  Verwandte Referenzen: PMID:21617040, PMID:22576015, PMID:23434374
• Bei bakteriellen Infektionen alkyliert Itaconat TFEB, löst eine Kerntranslokation und die Aktivierung von Lysosomengenen aus, um die Beseitigung von Erregern zu unterstützen.
  Verwandte Referenzen: PMID:35662396
• TFEB lokalisiert im Kern, Zytoplasma und an der Lysosomenmembran, was seine vielseitigen Rollen bei der zellulären Homöostase widerspiegelt.
• Es unterliegt Phosphorylierung, alternatives Spleißen und Ubiquitinierung und spielt Rollen in der adaptiven Immunität.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (Aminosäuren 50–173) deckt die N-terminale Region ab, die für humane TFEB-Isoformen gemeinsam ist, und erzeugt wahrscheinlich Antikörper, die sowohl die Volllänge als auch potenzielle Spleißvarianten erkennen. Validieren Sie die Bandenmuster in entsprechenden Lysaten.
• Für WB beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht 53 kDa, aber die Phosphorylierung kann zu einer leichten Verschiebung nach oben führen. Verwenden Sie eine Kern/Zytoplasma-Fraktionierung oder TFEB-Knockout/Knockdown-Proben, um die Spezifität zu bestätigen.
• In IF/ICC zeigt TFEB eine zytoplasmatische Retention unter nährstoffreichen Bedingungen und eine Kernakkumulation bei Hunger oder Lysosomenhemmung. Fügen Sie geeignete Kontrollen hinzu, um Änderungen der subzellulären Lokalisierung zu überprüfen.
• Für IHC-P können eine Antigen-Retrieval und eine Signalverstärkung erforderlich sein; Testen Sie mit bekannten positiven Geweben wie Niere oder Leber, wo die TFEB-Expression dokumentiert ist.
• Bei Verwendung von ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagent in Kombination mit rekombinantem TFEB-Protein eingesetzt werden; Optimieren Sie die Beschichtungskonzentrationen und Blockierungsbedingungen.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte ermöglicht vergleichende Studien, aber validieren Sie immer im spezies-spezifischen biologischen Kontext aufgrund potenzieller Epitopvariationen.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, kann die Charge-zu-Charge-Leistung variieren; Eine routinemäßige Qualitätskontrolle unter Verwendung eines Referenzstandards wird empfohlen, um reproduzierbare Ergebnisse zu gewährleisten.

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