[KD-validiert] Kaninchen-monoklonaler Anti-SREBF1-Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q9WTN3

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von SREBF1

• SREBF1 wird als Vorläuferprotein synthetisiert, das in die Membran des endoplasmatischen Retikulums eingebettet ist. Unter Bedingungen mit niedrigem Sterolgehalt wird es gespalten, wodurch ein Transkriptionsfaktor freigesetzt wird, der in den Zellkern gelangt und Gene für die Cholesterinbiosynthese und die Lipidhomöostase aktiviert (PubMed:11782483, PubMed:12855691, PubMed:19244231, PubMed:16100574). Zugehörige Referenzen: PMID:11782483 PMID:12855691 PMID:19244231 PMID:16100574
• Das aktive SREBF1 bindet an SRE-1- und E-Box-Motive und reguliert Promotoren von Genen der Cholesterinbiosynthese sowie den LDL-Rezeptorweg (PubMed:17290224, PubMed:19244231, PubMed:21459323). Die Bindung an E-Box-Motive wird aufgrund von Ähnlichkeiten abgeleitet. Zugehörige Referenzen: PMID:17290224 PMID:19244231 PMID:21459323
• Das Isoform SREBP-1A wird in ausgewählten Geweben exprimiert, weist eine hohe transkriptionelle Aktivität auf und stimuliert sowohl lipogene als auch cholesterogene Gene; außerdem trägt es zur angeborenen Immunität in Makrophagen bei (PubMed:8833906, PubMed:12855691, PubMed:21531336, PubMed:9062341). Zugehörige Referenzen: PMID:8833906 PMID:12855691 PMID:21531336 PMID:9062341
• Das Isoform SREBP-1C ist in den meisten Geweben die vorherrschende Form, weist eine schwächere Aktivität auf und kontrolliert hauptsächlich lipogene Gene, wodurch die Lipidsynthese in proliferierenden Zellen stark angetrieben wird (PubMed:8833906, PubMed:9062341, PubMed:12855691, PubMed:21531336). Zugehörige Referenzen: PMID:8833906 PMID:9062341 PMID:12855691 PMID:21531336
• Subzelluläre Lokalisation: SREBF1 zirkuliert sterolabhängig zwischen der Membran des endoplasmatischen Retikulums, der Membran des Golgi-Apparats, COPII-beschichteten Vesikeln und dem Zellkern.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Phosphorylierung und Ubiquitinierung, die die Proteinstabilität und die transkriptionelle Aktivität regulieren.
• Gewebespezifität: SREBF1 wird weit verbreitet exprimiert. SREBP-1C überwiegt in Leber, Nebenniere, Gehirn und Fettgewebe, während SREBP-1A selektiv in Geweben wie Darmepithelien und Makrophagen exprimiert wird.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid aus der N-terminalen Region (Aminosäuren 1-100) des murinen SREBP1. Diese Region ist zwischen Maus und Mensch konserviert, was die Kreuzreaktivität unterstützt.
• Im Western Blot wandert das vollständige SREBF1 bei etwa 120 kDa; für Proteine mit hohem Molekulargewicht sollten geeignete Gelkonzentrationen und Transferbedingungen verwendet werden. Zur Detektion der prozessierten nukleären Form kann eine Sterol-Depletion erforderlich sein.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) sollte die Antikörperspezifität mithilfe von Geweben als Positiv- und Negativkontrollen validiert werden; aufgrund der Kreuzreaktivität können sowohl humane als auch murine Gewebe getestet werden.
• Für ELISA sollte das immunisierende Peptid als Positivkontrolle verwendet und die Beschichtungsbedingungen optimiert werden.

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