[KD Validiert] Anti-METTL3 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q86U44

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: METTL3-Funktion und -Lokalisierung

• METTL3 ist die katalytische Untereinheit des METTL3-METTL14 heterodimeren N6-Adenosin-Methyltransferase-Komplexes, der m6A-Modifikationen auf RNA installiert (PubMed:22575960, PubMed:24284625, PubMed:25719671, PubMed:27281194, PubMed:27373337, PubMed:27627798). Verwandte Referenzen: PMID:22575960, PMID:24284625, PMID:25719671, PMID:27281194, PMID:27373337, PMID:27627798
• m6A-Methylierung fördert die mRNA-Destabilisierung und den Abbau und dient als Schlüsselregulator des mRNA-Umsatzes (PubMed:28637692). Verwandte Referenzen: PMID:28637692
• METTL3-vermittelte m6A-Methylierung ist an der DNA-Schadensantwort beteiligt, indem sie schnell Poly(A)-Transkripte an UV-induzierten Schadensstellen modifiziert und POLK rekrutiert (PubMed:28297716). Verwandte Referenzen: PMID:28297716
• METTL3 trägt zur Regulation der zirkadianen Uhr und des zirkadianen hepatischen Lipidstoffwechsels bei (PubMed:30428350). Verwandte Referenzen: PMID:30428350
• METTL3 methyliert pri-miRNAs und markiert sie für die DGCR8-Erkennung und -Verarbeitung (PubMed:25799998). Verwandte Referenzen: PMID:25799998
• METTL3 katalysiert m6A auf Xist-RNA und fördert die Xist-vermittelte transkriptionelle Repression während der zufälligen X-Inaktivierung (PubMed:27602518). Verwandte Referenzen: PMID:27602518
• METTL3 kann die mRNA-Translation unabhängig von seiner Methyltransferase-Aktivität fördern, indem es mit Translationsinitiationsfaktoren im Zytoplasma interagiert; seine Überexpression steht im Zusammenhang mit der Proliferation von Krebszellen (PubMed:27117702). Verwandte Referenzen: PMID:27117702
• Während einer SARS-CoV-2-Infektion fügt METTL3 m6A-Modifikationen an viraler RNA hinzu, dämpft die RIG-I-Bindung und unterdrückt angeborene Immunantworten (PubMed:33961823). Verwandte Referenzen: PMID:33961823
• Die subzelluläre Lokalisierung ist primär nukleär, angereichert in nukleären Speckles, und auch im Zytoplasma nachweisbar. Es wird weit verbreitet auf niedrigem Niveau exprimiert, insbesondere in Milz, Thymus, Prostata, Hoden, Eierstöcken, Dünndarm, Dickdarm und peripheren Blutleukozyten. Es ist ein Phosphoprotein, acetyliert und unterliegt alternativem Spleißen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen die Aminosäuren 2-250 des humanen METTL3 hergestellt, entsprechend der N-terminalen Region, die die MT-A70-Domäne enthält. Es wird erwartet, dass er in WB das vollständige METTL3 bei ~64 kDa detektiert.
• Für IF/ICC ist ein nukleäres und nukleäres Speckle-Färbemuster zu erwarten; erwägen Sie eine Co-Färbung mit nukleären Markern.
• Bestätigen Sie in IP-Experimenten die Spezifität durch Einbeziehung einer negativen Kontroll-IgG und validieren Sie die Co-Immunpräzipitation von METTL14, falls der Komplex untersucht wird.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte macht ihn für Studien an Nagetiermodellen geeignet; validieren Sie ihn jedoch im relevanten Gewebe oder der Zelllinie.
• Optimieren Sie die Antikörperverdünnung für jede Anwendung; typische Startverdünnungen werden nicht angegeben, daher wird eine empirische Titration empfohlen.

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