[KD Validiert] Anti-MAD1/MAD1L1 Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q9Y6D9

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: MAD1/MAD1L1 Funktion und Lokalisierung

• MAD1L1 (auch bekannt als MAD1, TXBP181) kodiert das mitotische Spindel-Checkpoint-Protein MAD1, einen kritischen Wächter der mitotischen Genauigkeit.
• Es bildet einen heterotetrameren Komplex mit geschlossenem MAD2L1 (C-MAD2) an nicht angehefteten Kinetochoren, fördert die Umwandlung von offenem MAD2L1 (O-MAD2) in C-MAD2, um das „Warte-Anaphase“-Signal zu propagieren. Verwandte Referenzen: PMID:10049595 PMID:20133940 PMID:29162720
• Beim hepatozellulären Karzinom kann MAD1 MAD2L1 im Zytoplasma sequestrieren, wodurch der Spindel-Checkpoint beeinträchtigt und zur chromosomalen Instabilität beigetragen wird.
• Das Protein lokalisiert sich dynamisch an Kinetochoren, Zentrosomen, Spindelpolen und der Kernhülle während der Mitose und shuttelt auch durch das Zytoplasma.
• MAD1 unterliegt posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung und Acetylierung, die seine zellzyklusabhängigen Funktionen regulieren.
• Die Gewebeexpression ist bemerkenswert in hepatozellulären Karzinomen und Hepatom-Zelllinien, was mit seiner onkogenen Relevanz übereinstimmt.
• Alternatives Spleißen von MAD1L1 generiert mehrere Isoformen, und Mutationen sind mit krebsbedingten Checkpoint-Defekten assoziiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 351–718 von humanem MAD1 und deckt einen großen, über Isoformen konservierten C-terminalen Bereich ab; dieser polyklonale Antikörper kann daher mehrere Varianten erkennen.
• Für den Western Blot beträgt das erwartete Molekulargewicht ca. 83 kDa; verwenden Sie ein 10% SDS-PAGE-Gel und stellen Sie einen vollständigen Transfer für hochmolekulare Proteine sicher.
• Die ELISA-Reaktivität sollte unter den spezifischen Assay-Bedingungen validiert werden; erwägen Sie Checkerboard-Titrationen, um die optimale Beschichtungsantigen- und Antikörperkonzentration zu bestimmen.
• Wie bei jedem polyklonalen Reagenz sollte die Chargen-zu-Chargen-Konsistenz unter Verwendung eines standardisierten Zelllysats oder rekombinanten Proteins bestätigt werden.

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