KD-validierter monoklonaler Anti-GM130-Kaninchenantikörper für WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA – Q08379

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von GM130

• GM130 (GOLGA2) ist ein 130-kDa-Matrixprotein des Cis-Golgi, das auch als Golgin-95 bekannt ist und zur Golgin-Familie der Coiled-Coil-Proteine gehört.
• Es fungiert als peripheres Membranskelett, das die Struktur des Golgi-Apparats aufrechterhält und die Anheftung von Vesikeln an die Golgi-Membran erleichtert. Verwandte Referenzen: PMID:16489344
• Zusammen mit p115/USO1 und STX5 vermittelt es die Anheftung und Fusion von Vesikeln am Cis-Golgi-Netzwerk und ist für die geschichtete und miteinander verbundene Golgi-Architektur essenziell.
• Ist für den normalen Proteintransport vom endoplasmatischen Retikulum zum Golgi und zur Zellmembran erforderlich (aufgrund von Ähnlichkeiten).
• Ist zentral für den mitotischen Abbau des Golgi: Die Phosphorylierung an Ser-37 durch CDK1 zu Beginn der Mitose unterbricht die Interaktion mit p115/USO1, blockiert die Anheftung von COPI-Vesikeln und stoppt den Golgi-Transport.
• Spielt eine entscheidende Rolle beim Aufbau der Spindelpole und bei der Organisation des Zentrosoms, indem es TPX2 durch Sequestrierung von Importin-Alpha aktiviert und dadurch Mikrotubuli um den Golgi herum nucleiert; reguliert außerdem den Aufbau der meiotischen Spindel. Verwandte Referenzen: PMID:19242490, PMID:26165940
• Ist für die Bildung des Golgi-Bandes und die korrekte Glykosylierung von Membran- und sekretorischen Proteinen erforderlich. Verwandte Referenzen: PMID:16489344, PMID:17314401
• Lokalisiert sich an der Membran des Cis-Golgi-Netzwerks, im intermediären Kompartiment zwischen endoplasmatischem Retikulum und Golgi sowie an den Polen der mitotischen Spindel; unterliegt der Methylierung und dem alternativen Spleißen; Mutationen stehen mit geistiger Behinderung in Verbindung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 20–300 des humanen GM130 (NP_004477.3) und zielt auf eine Region vor den Coiled-Coil-Domänen ab; dadurch können sowohl das Volllängenprotein als auch N-terminale Isoformen erkannt werden.
• Zu den empfohlenen Anwendungen gehören Western Blot (Nachweis bei etwa 130 kDa), Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC), Immunhistochemie an paraffineingebettetem Gewebe (IHC-P) und ELISA, wie vom Lieferanten unterstützt.
• Eine Spezies-Kreuzreaktivität mit Mensch, Maus und Ratte wurde berichtet; validieren Sie den Antikörper in Ihrem experimentellen Modell.
• Bei der Immunfluoreszenz dient GM130 als gut etablierter Cis-Golgi-Marker; verwenden Sie geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle, um die Golgi-Morphologie sichtbar zu machen.
• Eine durch Mitose oder Stress induzierte Fragmentierung des Golgi kann das Färbemuster von GM130 verändern; erwägen Sie eine Ko-Färbung mit anderen Organellenmarkern.
• Für ELISA kann der Antikörper als Nachweis- oder Fängerreagenz verwendet werden; eine Optimierung der Beschichtungsbedingungen und der Antikörperkonzentration wird empfohlen.

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