[KD Validiert] Anti-FGFR3 Polyklonaler Antikörper für WB, FC, ELISA - P22607

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: FGFR3-Funktion und -Lokalisierung

• Fibroblast Growth Factor Receptor 3 (FGFR3), auch als CD333, JTK4 und ACH bezeichnet, ist ein Mitglied der Immunglobulin-Superfamilie der Tyrosinkinaserezeptoren. Durch alternatives Spleißen werden multiple Isoformen erzeugt, einschließlich einer sezernierten Isoform (Isoform 3), die die Ligandenbindungsfähigkeit beibehält.
• FGFR3 ist ein Zelloberflächenrezeptor, der Fibroblast-Wachstumsfaktoren bindet und intrazelluläre Signalkaskaden auslöst, die die Zellproliferation, -differenzierung und den programmierten Zelltod (Apoptose) regulieren. Er ist essentiell für die normale Chondrozytendifferenzierung und Skelettentwicklung und moduliert auch die Osteogenese und die postnatale Knochenmineralisierung.
• Die Ligandenbindung aktiviert Schlüsselwege: Die Phosphorylierung von PLCG1 erzeugt second messenger; die FRS2-Phosphorylierung rekrutiert GRB2/SOS1, was zur RAS-MAPK (ERK1/2)-Aktivierung führt, und aktiviert auch den AKT1-Signalweg. Diese Kaskaden vermitteln diverse zelluläre Ergebnisse, einschließlich Apoptose in Chondrozyten und Proliferation in Krebszellen.
• FGFR3 ist hauptsächlich an der Plasmamembran lokalisiert, findet sich aber auch in zytoplasmatischen Vesikeln und dem endoplasmatischen Retikulum. Die sezernierte Isoform 3 kann die FGF-Signalisierung stören, indem sie Liganden extrazellulär bindet.
• Die Gewebeexpression umfasst Gehirn, Niere, Hoden und fetale Gewebe wie Lunge, Dünndarm und Niere. Isoform 2 wird in Epithelzellen nachgewiesen, während Isoform 1 in fibroblastären Zellen gefunden wird.
• Eine Dysregulation von FGFR3, oft durch aktivierende Mutationen verursacht, ist mit Skelettdysplasien (z. B. Achondroplasie, thanatophore Dysplasie), Kraniosynostose und verschiedenen Krebsarten verbunden. Konstitutiv aktives FGFR3 fördert die STAT1-, STAT5- und PTPN11/SHP2-Signalisierung und trägt zur Tumorentstehung bei.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen erstreckt sich über die extrazelluläre Region (Aminosäuren 23–375), die in allen membrangebundenen und sezernierten Isoformen vorhanden ist. Überprüfen Sie den Nachweis der gewünschten Isoformen in Ihrer Probenmatrix durch Konsultation der Literatur und Verwendung von isoformspezifischen Kontrollen.
• Beim Western Blot sind aufgrund unterschiedlicher Glykosylierung und Isoformexpression mehrere Bänder zwischen 75 und 88 kDa zu erwarten. Optimieren Sie die Ladungskontrollen und erwägen Sie die Verwendung von Entglykosylierungsenzymen, um die Spezifität zu bestätigen.
• Verwenden Sie für die Durchflusszytometrie nicht permeabilisierte Zellen, um Oberflächen-FGFR3 anzuvisieren. Fügen Sie eine relevante Isotyp-Kontrolle hinzu und validieren Sie mit FGFR3-überexprimierenden oder siRNA-knockdown Zelllinien.
• Im ELISA kann die sezernierte Isoform 3 mit Fang- oder Detektionsantikörpern konkurrieren. Klären Sie Kulturüberstände vorab oder verwenden Sie monoklonale/polyklonale Paare, die gegen nicht überlappende Epitope entwickelt wurden.

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