[KD Validiert] Anti-eIF4E Kaninchen Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P06730

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von eIF4E

• eIF4E (kodiert von EIF4E; Aliase EIF4EL1, EIF4F) ist ein 25 kDa mRNA-Cap-bindendes Protein und die essentielle Cap-Erkennungs-Untereinheit des eIF4F-Translationsinitiationskomplexes, der die cap-abhängige Translation antreibt, indem es die Rekrutierung des 43S-Präinitiationskomplexes an das 5'-Ende der mRNA erleichtert. Verwandte Referenzen: PMID:11606200 PMID:22578813 PMID:22684010
• Es bindet spezifisch die 7-Methylguanosin (m7G)-Cap-Struktur von mRNAs und fördert das ATP-abhängige Aufwickeln von 5'-terminalen Sekundärstrukturen, ein kritischer Schritt für Ribosomenbindung und Scanning. Verwandte Referenzen: PMID:16271312 PMID:22578813
• Im Zellkern vermittelt eIF4E den mRNA-Export durch Bildung von Komplexen mit LRPPRC und XPO1; es erleichtert den nukleocytoplasmatischen Transport spezifischer Transkripte wie NOS2/iNOS und MDM2 und beeinflusst dadurch deren cytoplasmatische Expression. Verwandte Referenzen: PMID:23471078 PMID:22684010
• In cytoplasmatischen P-Körpern ist eIF4E an einem Komplex beteiligt, der translationsinaktive mRNAs sequestriert, deren Abbau verhindert und Speicherung oder spätere translationsreaktivierung ermöglicht. Verwandte Referenzen: PMID:24335285
• Gemeinsam mit EIF4G1 wird eIF4E für die TISU (Translation Initiator of Short 5′ UTR)-abhängige Translation benötigt, ein nicht-scannender Mechanismus, der die Anforderung an das durch eIF1 vermittelte Scanning umgeht. Verwandte Referenzen: PMID:29987188
• eIF4E lokalisiert in mehreren subzellulären Kompartimenten: Cytoplasma (einschließlich P-Körpern und Stressgranula) und Zellkern (Kernspeckel, Kernkörperchen), eine Verteilung, die seine Doppelfunktionen bei der Translation und dem RNA-Export widerspiegelt.
• Das Protein wird posttranslational durch Acetylierung und Phosphorylierung modifiziert, die seine Cap-Bindungsaffinität und Interaktion mit Bindungspartnern modulieren.
• Dysregulation von eIF4E ist mit Autismus-Spektrum-Störungen und Tumorigenese verbunden, oft durch chromosomale Umlagerungen oder Überexpression, die zelluläre Translationsprogramme verändern.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen liegt im N-terminalen Bereich (aa 1‑100), einem Bereich, der nicht stark modifiziert ist; diese Antikörper können sowohl phosphoryliertes als auch nicht phosphoryliertes eIF4E nachweisen, aber Benutzer sollten die Spezifität in ihren eigenen Systemen überprüfen.
• Für Western Blot erwarten Sie eine Hauptbande bei ~25 kDa; das angegebene Molekulargewicht von eIF4E beträgt 25 kDa (theoretisch ~25.1 kDa) und kann je nach Phosphorylierungsstatus als einzelne oder Doppelbande erscheinen.
• Bei IHC-P sollten Antigen-Retrieval-Bedingungen (z. B. Citratpuffer pH 6.0) optimiert werden; Positive Kontrollen umfassen Gewebe mit hoher eIF4E-Expression wie Hoden, proliferierende Zellen oder bestimmte Tumorschnitte.
• Für die Immunpräzipitation verwenden Sie Protein A- oder G-Kügelchen, die für kaninchen polyklonale Antikörper geeignet sind; die Quervernetzung des Antikörpers an die Kügelchen kann die Rückgewinnung von gering abundance Komplexen verbessern.
• IF/ICC kann sowohl cytoplasmatische als auch nukleäre Färbung zeigen; Fügen Sie geeignete Permeabilisierungs- und Blockierungsschritte hinzu und erwägen Sie die Co-Färbung mit P-Körper- oder Kernmarkern, um Lokalisationänderungen zu beurteilen.

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