[KD Validiert] Anti-ECHS1 monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P30084

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ECHS1-Funktion und -Lokalisierung

• ECHS1 kodiert die mitochondriale Enoyl-CoA-Hydratase, auch bekannt als Short-Chain Enoyl-CoA Hydratase (SCEH), ein Schlüsselenzym in der Beta-Oxidation von Fettsäuren.
• Katalysiert die Hydratation von trans-2-Enoyl-CoA-Spezies zu (3S)-3-Hydroxyacyl-CoA, essentiell für den Abbau von kurz- und mittelkettigen Fettsäuren (C4–C16) (PubMed:25125611, PubMed:26251176).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:25125611
  PMID:26251176
• Zeigt hohe Substratspezifität für Crotonyl-CoA und moderate Aktivität gegenüber Acryloyl-CoA, 3-Methylcrotonyl-CoA und Methacrylyl-CoA (PubMed:26251176).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:26251176
• Besitzt Isomerase-Aktivität und wandelt trans-3-Enoyl-CoA in trans-2-Enoyl-CoA um, wenn auch mit einer geringeren Rate als seine Hydratase-Funktion.
• In der mitochondrialen Matrix lokalisiert, was mit seiner metabolischen Rolle übereinstimmt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Phosphorylierung; mit Krankheitsvarianten bei Neurodegeneration in Verbindung gebracht.
• Vorwiegend exprimiert in Leber, Fibroblasten und Muskel, mit minimaler Expression in Milz und Niere.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 28-290 von humanem ECHS1, unter Ausschluss des N-terminalen mitochondrialen Zielpeptids (aa 1-27). Dieses Design begünstigt die Erkennung der reifen, prozessierten Form des Proteins.
• Für Western Blot (WB) ist ein Band bei ~31 kDa zu erwarten; validieren Sie mit einer Positivkontrolle (z.B. Leber- oder Fibroblastenlysaten) und ziehen Sie die Verwendung einer Knockout-Zelllinie zur Bestätigung der Spezifität in Betracht.
• Für Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) optimieren Sie die Antigen-Retrieval- und Permeabilisierungsbedingungen; endogenes ECHS1 ist in Mitochondrien lokalisiert, daher kann eine Co-Färbung mit mitochondrialen Markern als Kontrolle dienen.
• In ELISA kann das rekombinante Immunogenprotein als Standard verwendet werden, jedoch müssen die Assay-Bedingungen für die Antikörper-Antigen-Bindung möglicherweise optimiert werden.

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