K48-Verknüpfungsspezifischer Ubiquitin Kaninchen mAb - P0CG47

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Ubiquitin-Funktion und Lokalisation

• Polyubiquitin-B, kodiert durch das UBB-Gen, ist ein Vorläuferprotein, das gespalten wird, um mehrere Ubiquitin-Monomere zu erzeugen.
• Ubiquitin existiert entweder frei oder kovalent über eine Isopeptidbindung an Zielproteine gebunden und dient als vielseitiger posttranslationaler Modifikator.
• Polyubiquitinketten können durch verschiedene Lysin-Verknüpfungen (z.B. K6, K11, K29, K33, K48, K63) oder lineare Verknüpfungen gebildet werden, die jeweils unterschiedliche zelluläre Schicksale bestimmen.
• K48-verknüpfte Polyubiquitinketten zielen primär auf Proteine für den Abbau durch das 26S-Proteasom ab, ein kritischer Weg für die Proteinqualitätskontrolle und Zellzyklusregulation.
• K63-verknüpfte Ketten sind an nicht-proteolytischen Prozessen wie Endozytose, DNA-Schadensantworten und Aktivierung des NF-kappa-B-Transkriptionsfaktors beteiligt.
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst das Zytoplasma, den Zellkern und die äußere Mitochondrienmembran, was seine vielfältigen funktionellen Rollen widerspiegelt.
• Ubiquitin selbst unterliegt posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung und ADP-Ribosylierung, die seine Aktivität und Interaktionen modulieren können.
• Freie (nicht verankerte) Polyubiquitinketten sind ebenfalls an der zellulären Signalübertragung beteiligt, wie z.B. der Aktivierung von Proteinkinasen, unabhängig von ihrer Konjugation an andere Proteine.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das speziell für die Erkennung der K48-verknüpften Polyubiquitin-Topologie entwickelt wurde. Ziehen Sie die Verwendung verknüpfungsspezifischer Kontrollen in Betracht, um die Antikörperspezifität zu bestätigen.
• Für Western Blotting (WB) wird die Probenvorbereitung unter denaturierenden und reduzierenden Bedingungen empfohlen, um Ubiquitin-Konjugate nachzuweisen. Validieren Sie die Leistung in Ihrem spezifischen Proben system.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF/ICC) sollten geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle optimiert werden, um Ubiquitin-Signale zu erhalten. Schließen Sie negative Kontrollen ein, um den Hintergrund zu beurteilen.
• Für ELISA-Anwendungen sollten Beschichtungsantigene sorgfältig ausgewählt werden, um das K48-Verknüpfungs-Epitop nachzuahmen. Bestätigen Sie die Nachweisgrenzen mit bekannten Standards.
• Die Kreuzreaktivität wird nur für humane Proben berichtet. Wenn Sie mit anderen Spezies arbeiten, überprüfen Sie die Sequenzhomologie und führen Sie zusätzliche Validierungen durch.

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