JAK2-Kaninchen-pAb für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O60674

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von JAK2

• JAK2 (Januskinase 2) ist eine Rezeptor-unabhängige Tyrosin-Proteinkinase, die eine zentrale Rolle bei der Signalübertragung von Zytokinen und Wachstumsfaktoren spielt. Sie phosphoryliert Zytokinrezeptoren vom Typ I (z. B. GHR, PRLR, EPOR, MPL) und vom Typ II (z. B. Interferonrezeptoren und Interleukinrezeptoren) und leitet dadurch nachgeschaltete Signalkaskaden ein (PubMed:15690087, PubMed:15899890, PubMed:7615558). Zugehörige Referenzen: PMID:15690087 PMID:15899890 PMID:7615558
• Nach der Aktivierung des Rezeptors phosphoryliert JAK2 STAT-Proteine, was zu deren Dimerisierung, Translokation in den Zellkern und Aktivierung der Gentranskription führt. Dieser Mechanismus ist für Prozesse wie die Erythropoese entscheidend, bei der die durch EPO induzierte JAK2-Aktivierung STAT5 rekrutiert und phosphoryliert, das anschließend die Expression von Genen im Zusammenhang mit der Erythropoese hochreguliert (PubMed:9618263, PubMed:9657743). Zugehörige Referenzen: PMID:9618263 PMID:9657743
• Über die zytoplasmatische Signalübertragung hinaus wirkt JAK2 im Zellkern, indem es Histon H3 an Tyrosin 41 (H3Y41ph) phosphoryliert. Diese Modifikation verdrängt das Heterochromatin-Protein CBX5 (HP1α) aus dem Chromatin und unterstreicht damit eine direkte Rolle bei der Chromatinregulation und epigenetischen Kontrolle (PubMed:19783980). Zugehörige Referenz: PMID:19783980
• JAK2 ist an verschiedenen Signalwegen beteiligt, darunter die durch Angiotensin II induzierte Phosphorylierung von ARHGEF1, die Phosphorylierung von CDKN1B zur Regulation des Zellzyklus sowie die reziproke Phosphorylierung mit TEC zur Aktivierung der FOS-Transkription. Außerdem moduliert JAK2 die Aktivität des Kaliumkanals KCNA3 und ist an der CNTF/OSM-Rezeptorsignalübertragung beteiligt (PubMed:20098430, PubMed:21423214, PubMed:25644777, PubMed:11294841, PubMed:9188471). Zugehörige Referenzen: PMID:20098430 PMID:21423214 PMID:25644777 PMID:11294841 PMID:9188471
• Auf subzellulärer Ebene kommt JAK2 im Endomembransystem, im Zytoplasma und im Zellkern vor, wodurch seine vielfältigen Funktionen bei der Signalübertragung von membrannahen Ereignissen bis hin zu direkten Chromatininteraktionen ermöglicht werden.
• JAK2 wird in den meisten Geweben ubiquitär exprimiert, was mit seiner grundlegenden Rolle bei der Zytokinsignalübertragung und der Regulation der Hämatopoese übereinstimmt. Es wird als Protoonkogen klassifiziert; chromosomale Umlagerungen und Mutationen stehen im Zusammenhang mit myeloproliferativen Erkrankungen.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Die Immunogensequenz (Aminosäuren 933–1132) befindet sich in der Kinasedomäne von JAK2, die bei Mensch, Maus und Ratte stark konserviert ist, wodurch die vorhergesagte Kreuzreaktivität unterstützt wird. Überprüfen Sie dennoch die Reaktivität in Ihrem spezifischen Modellsystem.
• Beim Western Blot (WB) liegt die erwartete Bande bei etwa 131 kDa. Verwenden Sie geeignete Ladekontrollen und ziehen Sie den Einsatz von Phosphataseinhibitoren in Betracht, um Phosphorylierungszustände zu erhalten.
• Bei Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) kann JAK2 eine zytoplasmatische und nukleäre Lokalisation zeigen. Beziehen Sie geeignete negative und positive Kontrollgewebe ein (z. B. Knochenmark oder Milz für die hämatopoetische Expression).
• Der Antikörper ist für ELISA geeignet. Stellen Sie sicher, dass das optimale Beschichtungsantigen und die optimale Antikörperverdünnung empirisch bestimmt werden.

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