IKKβ Kaninchen-monoklonaler Antikörper für IF/ICC und ELISA - O14920

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von IKKβ

• IKKβ (Inhibitor der nuklearen Faktor-kappa-B Kinase-Untereinheit Beta), auch bekannt als IKK2 oder NFKBIKB, ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die vom IKBKB-Gen kodiert wird. Sie ist ein Kernbestandteil des kanonischen IKK-Komplexes, der den NF-κB-Signalweg aktiviert (PubMed:9346484). Verwandte Referenzen: PMID:9346484

• Es phosphoryliert NF-κB-Inhibitoren (IκB) an zwei kritischen Serinresten, was deren Polyubiquitinierung und proteasomale Degradation auslöst. Dadurch kann NF-κB in den Zellkern translozieren und die Genexpression aktivieren (PubMed:20434986, PubMed:20797629, PubMed:21138416). Verwandte Referenzen: PMID:20434986, PMID:20797629, PMID:21138416

• Neben IκB phosphoryliert IKKβ weitere Wegkomponenten, darunter NEMO/IKBKG, RELA, NFKB1, TBK1 und IKBKE, was als negativer Rückkopplungsmechanismus zur Verhinderung einer Überproduktion von Entzündungsmediatoren dienen kann (PubMed:11297557, PubMed:14673179, PubMed:20410276). Verwandte Referenzen: PMID:11297557, PMID:14673179, PMID:20410276

• Die Kinase phosphoryliert außerdem FOXO3 und vermittelt so die TNF-abhängige Inaktivierung dieses proapoptotischen Transkriptionsfaktors (PubMed:15084260), sowie andere Substrate wie NAA10, NCOA3, BCL10 und IRS1 (PubMed:17213322, PubMed:19716809). Verwandte Referenzen: PMID:15084260, PMID:17213322, PMID:19716809

• IKKβ ist an der Aktivierung von IRF5 beteiligt, indem es dessen C-Terminus phosphoryliert, um die Homodimerisierung und nukleare Translokation zu stimulieren (PubMed:25326418). Als Reaktion auf LPS phosphoryliert es STAT1 an Thr-749 und moduliert so die Entzündungsgenexpression (PubMed:32209697, PubMed:38621137). Verwandte Referenzen: PMID:25326418, PMID:32209697, PMID:38621137

• Subzellulär ist IKKβ im Zytoplasma, im Zellkern und in Membran-Rafts zu finden. Es wird stark in Herz, Plazenta, Skelettmuskel, Niere, Bauchspeicheldrüse, Milz, Thymus, Prostata, Hoden und peripherem Blut exprimiert.

• Posttranslationelle Modifikationen umfassen Acetylierung, Hydroxylierung, Phosphorylierung, S-Nitrosylierung und Ubiquitinierung, was seine strenge Regulation widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das zur Herstellung dieses kaninchen-monoklonalen Antikörpers verwendete Immunogen deckt die Aminosäuren 450-756 ab, was dem C-Terminus-Bereich von menschlichem IKKβ entspricht. Dieses Design kann eine spezifische Erkennung von vollem IKKβ in denaturierter oder nativer Konformation ermöglichen.
• Für IF/ICC empfehlen sich geeignete Fixierungs- (z. B. 4 % PFA) und Permeabilisierungsprotokolle (z. B. 0,1 % Triton X-100). Validieren Sie den Antikörper in IKKβ-exprimierenden Zelllinien wie HeLa oder HEK293.
• Bei ELISA-Anwendungen kann der Antikörper für die direkte oder Sandwich-Detektion verwendet werden; eine Optimierung von beschichtetem Antigen und Antikörperverdünnung wird empfohlen.
• Da der Antikörper in Kaninchen gewonnen wird, wählen Sie kompatible Sekundärantikörper für die Detektion und berücksichtigen Sie potenzielle Kreuzreaktivität mit endogenen Immunglobulinen in Gewebeproben.
• Fügen Sie immer Positiv- und Negativkontrollen (z. B. IKKβ-Knockout-Lysate oder Blockierungspeptide) hinzu, um die Spezifität zu bestätigen.

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