IFNAR2 Kaninchen pAb für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P48551

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von IFNAR2

• IFNAR2 (Interferon-Alpha/Beta-Rezeptor 2), auch bekannt als IFNABR, IFNARB oder IFN-alpha-REC, kodiert die Beta-Kette des Typ-I-Interferonrezeptors. Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen; insbesondere Isoform 3 ist eine sezernierte Form, die im Urin nachgewiesen wurde (PubMed:7759950, PubMed:8181059). Der Rezeptor wird in Blutzellen, lymphoblastoiden und Fibrosarkom-Zelllinien exprimiert. Verwandte Referenzen: PMID:7759950 PMID:8181059
• Gemeinsam mit IFNAR1 bildet IFNAR2 den funktionalen heterodimeren Rezeptor für Typ-I-Interferone (IFN-α, -β, -ε, -ω, -κ) (PubMed:10049744, PubMed:10556041, PubMed:21854986). Die Ligandenbindung bringt die Untereinheiten in enge Nähe und löst die Aktivierung assoziierter Janus-Kinasen aus. Verwandte Referenzen: PMID:10049744 PMID:10556041 PMID:21854986
• Die Rezeptoraktivierung treibt die Transphosphorylierung von JAK1 (gebunden an IFNAR2) und TYK2 (gebunden an IFNAR1) an (PubMed:10556041, PubMed:11682488, PubMed:12105218). Anschließend werden spezifische Tyrosinreste an den intrazellulären Domänen von IFNAR1/2 phosphoryliert, wodurch Docking-Stellen für STAT1 und STAT2 entstehen (PubMed:11682488, PubMed:12105218, PubMed:21854986). Verwandte Referenzen: PMID:10556041 PMID:11682488 PMID:12105218 PMID:21854986
• Phosphorylierte STAT-Proteine wandern in den Zellkern, um die Transkription von Hunderten interferonstimulierter Gene (ISG) zu modulieren und so antivirale, antiproliferative und immunmodulatorische Antworten zu organisieren (PubMed:12105218, PubMed:28165510, PubMed:9121453). Verwandte Referenzen: PMID:12105218 PMID:28165510 PMID:9121453
• Abgesehen von seiner Rolle bei der Signalübertragung kann IFNAR2 auch als potenter Inhibitor der Typ-I-Interferonrezeptoraktivität wirken, wahrscheinlich durch kompetitive Ligandenbindung oder Regulation der Rezeptorstabilität.
• Das Protein durchspannt die Zellmembran und enthält extrazelluläre Fibronektin-Typ-III-Domänen; es wird glykosyliert und bildet Disulfidbindungen, wie proteomische Analysen belegen, und unterliegt einer regulatorischen Phosphorylierung.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (AA 27-243), daher wird erwartet, dass der Antikörper die ligandenbindende Region targetiert; geeignet für Rezeptorblockierungsstudien oder den Nachweis löslicher Rezeptoren in Bioflüssigkeiten.
• Für Western Blotting wird eine Bande bei ~58 kDa vorausgesagt; aufgrund N-verknüpfter Glykosylierung und möglicher proteolytischer Prozessierung können jedoch zusätzliche Banden oder ein höheres scheinbares Molekulargewicht beobachtet werden. Validieren Sie mit Positivkontrollen (z. B. IFN-behandelte Zellen) und Negativkontrollen.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) wird Membranfärbung erwartet. Bei Geweben oder Zellen, die die sezernierte Isoform exprimieren, kann ein zytoplasmatisches oder extrazelluläres Matrixsignal nachgewiesen werden; geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle sollten getestet werden.
• Für ELISA kann dieser polyklonale Antikörper als Detektionsreagenz verwendet werden, wenn er mit einem geeigneten monoklonalen Einfangantikörper gepaart wird; die Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-IFNAR2 sollte in der Assay-Matrix überprüft werden.
• Als polyklonaler Antikörper sollte die Charge-zu-Charge-Konsistenz überwacht werden, und für neue Anwendungen werden Titrationsexperimente empfohlen.

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