Human IgM Rabbit pAb für WB, ELISA - P01871

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von humanem IgM

• IGHM kodiert die konstante Region der Immunglobulin-mu-Schwerkettenkette und bildet IgM-Antikörper. Membrangebundenes IgM dient als B-Zell-Rezeptor (BCR), der nach Antigenbindung klonale Expansion und Differenzierung auslöst, während sezerniertes IgM die Pathogeneliminierung vermittelt (PubMed:20176268, PubMed:22158414). Verwandte Referenzen: PMID:20176268, PMID:22158414

• Sekretiertes IgM (sIgM) multimerisiert zu Pentameren oder Hexameren, was eine hochavide Antigenerkennung und -avidität ermöglicht (PubMed:32029689, PubMed:37095205). Verwandte Referenzen: PMID:32029689, PMID:37095205

• Effektorfunktionen von sIgM umfassen die Bindung an den hochaffinen Fc-Rezeptor FCMR auf lymphoiden Zellen, was neutralisierende IgG-Antworten fördert und gleichzeitig die Selbttoleranz aufrechterhält. Es rekrutiert auch C1q, um den klassischen Komplementweg zu aktivieren, und erleichtert die Phagozytose apoptotischer Zellen (PubMed:12847249, PubMed:19006321, PubMed:28230186). Verwandte Referenzen: PMID:12847249, PMID:19006321, PMID:28230186

• IgM spielt eine Rolle in der mukosalen Immunität: Es unterliegt einer Transzytose über das mukosale Epithel via PIGR und wird in die Mukosaschleimhäute sezerniert. IgM-Antigen-Komplexe durchlaufen eine FCMR-vermittelte Retrotranszytose über M-Zellen in darunterliegende lymphatische Gewebe (PubMed:32029689). Verwandte Referenzen: PMID:32029689

• Membrangebundenes IgM ist eine Komponente des B-Zell-Rezeptorkomplexes, der konstitutive tonische Signale liefert, die für das Überleben der B-Zelle essentiell sind, und prä-BCR-Signale für allelischen Ausschluss und Gen-Rearrangement vermittelt.

• Subzellulär sind IGHM-Produkte entweder sezerniert oder als Single-Pass Typ I Membranproteine auf der Zelloberfläche verankert.

• Als Glykoprotein mit Immunglobulin-Domänen enthält IgM intra- und interkettige Disulfidbrücken, die seine Struktur stabilisieren, und es durchläuft posttranslationale Glykosylierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen deckt die konstante Region (aa 213-453) von humanem IGHM ab und gewährleistet die Erkennung sowohl löslicher als auch membrangebundener IgM-Isoformen.
• Für Western Blotting wandert die IgM-Schwerkettenkette unter reduzierenden Bedingungen aufgrund von Glykosylierung und der variablen Region bei etwa 70 kDa; unter nicht-reduzierenden Bedingungen beobachtete Multimere können 900 kDa überschreiten. Optimieren Sie die Probenvorbereitung und Gelprozentzahl entsprechend.
• In ELISA kann dieser Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz für humanes IgM eingesetzt werden. Die Kombination mit einem monoklonalen Anti-Human-IgM-Detektionsantikörper kann die Assay-Spezifität erhöhen.
• Als polyklonaler Antikörper sollte die Chargen-zu-Charge-Konsistenz für quantitative Anwendungen überprüft werden; schließen Sie eine Kontrollprobe in jeden Lauf ein.
• Lagern Sie gemäß den Empfehlungen des Herstellers (typischerweise −20 °C) und minimieren Sie Gefrier-Tau-Zyklen.

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