HIF1β/ARNT Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für IF/ICC, ELISA - P27540

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von HIF1β/ARNT

• HIF1β/ARNT, auch bekannt als Klasse-E-Basic-Helix-Loop-Helix-Protein 2 (bHLHe2) oder hypoxie-induzierbarer Faktor 1-beta (HIF-1-beta), ist ein Transkriptionsfaktor, der vom ARNT-Gen kodiert wird.
• Es fungiert als obligater Heterodimerisierungspartner für mehrere bHLH-PAS-Proteine, einschließlich des Aryl-Hydrocarbon-Rezeptors (AHR), und vermittelt die Xenobiotika-Antwort durch Bindung an Xenobiotika-Antwortelemente (XREs) oder Dioxin-Antwortelemente (DREs) in den Promotoren der Zielgene. Verwandte Referenzen: PMID:28396409, PMID:34521881
• ARNT heterodimerisiert auch mit Alpha-Untereinheiten des hypoxie-induzierbaren Faktors (HIF1A, EPAS1, NPAS1 oder NPAS3), um hypoxie-induzierbare Transkriptionsfaktoren zu bilden, die Gene aktivieren, die an zellulären Reaktionen auf Hypoxie beteiligt sind, einschließlich Angiogenese, Erythropoese und metabolischer Anpassung. Verwandte Referenzen: PMID:16181639, PMID:20699359
• Das Protein lokalisiert sich im Zellkern, wo es seine transkriptionsregulatorische Funktion ausübt.
• ARNT unterliegt posttranslationalen Modifikationen wie Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung (Isopeptidbindung/ubl-Konjugation), die seine Aktivität und Stabilität regulieren können.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, die zur funktionellen Vielfalt beitragen.
• Strukturell enthält ARNT Basic-Helix-Loop-Helix- (bHLH) und PER-ARNT-SIM- (PAS) -Domänen, die für die DNA-Bindung und Dimerisierung unerlässlich sind.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einer C-terminalen Region (aa 465-570) von menschlichem HIF1β/ARNT; erwägen Sie die Überprüfung der Isoformspezifität mit geeigneten Kontrollen.
• Für IF/ICC kann eine nukleär lokalisiertes ARNT eine optimierte Permeabilisierung und Fixierung erfordern; fügen Sie einen nukleären Gegenfärber hinzu, um die Lokalisierung zu bestätigen.
• Verdünnen und validieren Sie bei ELISA den Antikörper unter Verwendung bekannter positiver und negativer Proben von Mensch, Maus oder Ratte, um die Kreuzreaktivität und Signallinearität zu bewerten.
• Da es sich um ein polyklonales Reagenz handelt, ist mit Chargen-zu-Chargen-Schwankungen zu rechnen; fügen Sie Referenzstandards in jedes Experiment ein.
• Die Induktion der ARNT-Expression mit Hypoxie-Mimetika (z. B. CoCl₂) kann die Detektion in zellbasierten Assays verbessern.

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