HDAC8-Kaninchen-mAb für IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA – Q9BY41

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von HDAC8

• Histon-Deacetylase 8 (HDAC8), auch als HDACL1 bekannt, ist ein Mitglied der Histon-Deacetylase-Familie der Klasse I. Sie katalysiert die Entfernung von Acetylgruppen aus Lysinresten an den N-terminalen Enden der Kernhistone (H2A, H2B, H3, H4), was zu einer Verdichtung des Chromatins und einer Repressions der Transkription führt. Diese Aktivität ist zentral für die epigenetische Regulation der Genexpression, den Zellzyklusverlauf und Entwicklungsprozesse. Zugehörige Referenzen: PMID:10748112 • PMID:10922473 • PMID:10926844
• HDAC8 wirkt innerhalb großer Multiproteinkomplexe und übt dort seine Deacetylase-Aktivität aus. Zusätzlich deacetyliert sie die Cohesin-Untereinheit SMC3 und reguliert dadurch während der Mitose die Freisetzung von Cohesinkomplexen aus dem Chromatin. Zugehörige Referenzen: PMID:22885700
• Über ihre Deacetylase-Funktion hinaus besitzt HDAC8 eine Protein-Decrotonylase-Aktivität und katalysiert die Entfernung von Crotonylgruppen ((2E)-Butenoyl) aus Histonen, wodurch ihre Rolle bei epigenetischen Modifikationen erweitert wird. Zugehörige Referenzen: PMID:28497810
• Das Protein kann zur Kontraktilität glatter Muskelzellen beitragen, was auf eine regulatorische Funktion außerhalb der Histone hinweist. Zugehörige Referenzen: PMID:15772115
• HDAC8 ist überwiegend im Zellkern und auf den Chromosomen lokalisiert, kann jedoch auch im Zytoplasma nachgewiesen werden, was auf einen dynamischen Transport zwischen den Zellkompartimenten hindeutet.
• Die Gewebeexpression ist weit verbreitet, jedoch auf niedrigem Niveau; eine höhere Expression wird in Herz, Gehirn, Niere, Pankreas, Leber, Lunge, Plazenta und Prostata beobachtet.
• Das Protein unterliegt Phosphorylierung und alternativem Spleißen. Mutationen in HDAC8 stehen mit Erkrankungen wie dem Cornelia-de-Lange-Syndrom und geistiger Behinderung in Verbindung, was seine klinische Bedeutung unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen (ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 1–100 der menschlichen HDAC8 umfasst) zielt auf die N-terminale Region ab. Ziehen Sie in Betracht, die Antikörperspezifität durch Peptidblockierung oder Knockdown-Experimente zu überprüfen.
• Führen Sie für IHC-P eine hitzevermittelte Antigenretrieval-Methode durch (z. B. Citratpuffer, pH 6,0) und testen Sie den Antikörper an Geweben, von denen bekannt ist, dass sie HDAC8 exprimieren, beispielsweise Herz- oder Gehirngewebe.
• Stellen Sie bei IF/ICC eine geeignete Permeabilisierung sicher (z. B. 0,1 % Triton X-100) und verwenden Sie eine Kerngegenfärbung, um die erwartete nukleäre Lokalisation zu bestätigen.
• Optimieren Sie für IP die Verhältnisse von Antikörper zu Lysat und validieren Sie die co-immunpräzipitierten Partner in der von Ihnen untersuchten Zelllinie.
• Bei ELISA kann eine sorgfältige Titration sowohl der Fänger- als auch der Detektionsantikörper erforderlich sein; verwenden Sie eine Negativkontrollvertiefung zur Bewertung des Hintergrunds.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wird aufgrund der Sequenzhomologie vorhergesagt. Vor umfangreichen Studien ist jedoch eine unabhängige Validierung in diesen Spezies ratsam.

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