HBG1/2 Rabbit mAb (WB, IHC, IF, ELISA) - P69891/P69892

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: HBG1/2-Funktion und -Lokalisierung

• Hämoglobin-Untereinheit Gamma-1 (HBG1) und Gamma-2 (HBG2) sind die Gamma-Globinketten, die zusammen mit Alpha-Globin fetales Hämoglobin (HbF, α2γ2) bilden, das vorherrschende Hämoglobin während der fetalen Entwicklung.
• HbF hat eine höhere Sauerstoffaffinität als adultes Hämoglobin (HbA), was einen effizienten Sauerstofftransfer über die Plazenta von Mutter zu Fötus erleichtert.
• Die Expression der Gamma-Globin-Gene ist hauptsächlich auf rote Blutkörperchen beschränkt und entwicklungsgesteuert, wobei ein Umschalten von Gamma- zu Beta-Globin-Expression um die Geburt herum erfolgt.
• Postnatal ist restliches HbF bei Erwachsenen in geringen Mengen vorhanden, und seine Reaktivierung ist ein therapeutisches Ziel bei Sichelzellkrankheit und Beta-Thalassämie.
• HBG1 und HBG2 sind hochhomolog und befinden sich innerhalb des menschlichen Beta-Globin-Genclusters auf Chromosom 11p15.4.
• Das Protein unterliegt verschiedenen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Acetylierung, Phosphorylierung und S-Nitrosylierung, die seine Stabilität und Funktion beeinflussen können.
• Schlüsselwörter im Zusammenhang mit HBG1 umfassen 3D-Struktur, Häm, Eisen, Metallbindung, Sauerstofftransport und Referenzproteom, was seine zentrale Rolle beim Sauerstofftransport unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem Peptid innerhalb der N-terminalen Region (Aa 1-100) von HBG1, das aufgrund der hohen Sequenzähnlichkeit sowohl HBG1 als auch HBG2 detektieren kann.
• Das beobachtete Proteinmolekulargewicht im SDS-PAGE beträgt ca. 12 kDa, was mit der monomeren Form von Gamma-Globin übereinstimmt. Validieren Sie die Bandengröße mit geeigneten Molekulargewichtsmarkern und Lysaten aus fetalem Hämoglobin-positiven Kontrollen.
• Für Western Blots sollten Sie die Verwendung von Lysaten roter Blutkörperchen aus fetalen oder Nabelblutproben oder Zelllinien in Betracht ziehen, die zur Expression von fetalem Hämoglobin induziert wurden.
• In IHC- und IF-Anwendungen ist eine zytoplasmische Färbung in erythroiden Zellen zu erwarten. Paraffineingebettete und gefrorene Schnitte von fetaler Leber oder Knochenmark sind geeignete Proben.
• Die ELISA-Leistung kann unter Verwendung von rekombinantem oder gereinigtem fetalem Hämoglobin-Protein bewertet werden. Die Kombination mit einem Alpha-Globin-Antikörper kann die Entwicklung eines Sandwich-Assays ermöglichen.

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