GRB2 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB - P62993

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: GRB2-Funktion und Lokalisierung

• GRB2 ist ein nicht-enzymatisches Adapterprotein, das eine kritische Verbindung in Signalkaskaden von Zelloberflächenrezeptoren zu nachgeschalteten zellulären Reaktionen darstellt, einschließlich Genexpression und verschiedener biologischer Prozesse wie angeborene und adaptive Immunität, Autophagie, DNA-Reparatur und Nekroptose. Verwandte Referenzen: PMID:11016927, PMID:11726515, PMID:37626338
• In T-Zellen bindet GRB2 nach TCR-Engagement an phosphoryliertes LAT, rekrutiert SOS1, um den KRAS/RAF1/MAPK-Weg zu aktivieren und reguliert so T-Zell-Aktivierung, -Differenzierung und -Funktion. Verwandte Referenzen: PMID:9489702, PMID:12171928, PMID:25870599, PMID:36864087
• Ähnlich verstärkt GRB2 in B-Zellen die Ca2+-Mobilisierung und ERK MAP-Kinase-Aktivierung nach Rekrutierung zum phosphorylierten BCR. Verwandte Referenzen: PMID:25413232, PMID:29523808
• GRB2 reguliert den Wechsel zwischen Autophagie und programmierter Nekrose durch Interaktion mit Nekrosom-Komponenten (z.B. RIPK1) und Autophagie-Regulatoren (z.B. SQSTM1, BECN1). Verwandte Referenzen: PMID:35831301, PMID:38182563
• Es moduliert die miRNA-Biogenese durch Bildung eines ternären Komplexes mit AGO2 und DICER1. Verwandte Referenzen: PMID:37328606
• GRB2 ist an der Replikationsstressantwort und der homologiedirektierten Reparatur (HDR) beteiligt, indem es RAD51 an gestoppten Gabeln stabilisiert und die MRE11-Rekrutierung reguliert. Verwandte Referenzen: PMID:34348893, PMID:38459011
• Eine natürlich vorkommende Isoform (Grb3-3) fehlt die SH2-Domänenfunktion und wirkt dominant-negativ, hemmt die RAS-ERK-Signalgebung und Zellproliferation, indem sie mit GRB2 um die SOS1-Bindung konkurriert. Verwandte Referenzen: PMID:36171279
• GRB2 ist hauptsächlich im Zytoplasma lokalisiert, kommt aber auch im Zellkern, in Endosomen und im Golgi-Apparat vor, was mit seinen Rollen im Signalverkehr übereinstimmt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitinierung (Isopeptidbindung), und es beherbergt SH2- und SH3-Domänen, die Interaktionen mit phosphotyrosinhaltigen Proteinen und prolinreichen Motiven vermitteln.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die C-terminale SH3-Domäne und die benachbarte Region, die möglicherweise die vollständige Länge von GRB2 und seine Isoformen erkennt; überprüfen Sie die Reaktivität in Ihrem Modelsystem.
• Für den Western Blot wandert GRB2 typischerweise bei ~25 kDa; verwenden Sie geeignete Ladungskontrollen und validieren Sie die Bandenspezifität in Knockdown- oder Knockout-Proben.
• Bei der Immunpräzipitation sollten Sie ein Quervernetzungsprotokoll oder einen sekundären Antikörper mit Leichtkettenspezifität in Betracht ziehen, um Interferenzen durch die ~25 kDa schwere IgG-Leichtkette zu vermeiden.
• Für die Immunhistochemie und Immunfluoreszenz wird die Optimierung von Antigen-Retrieval- und Blockierungsschritten für jeden Gewebetyp empfohlen.
• Die Kreuzreaktivität des Antikörpers mit Maus- und Ratten-GRB2 ermöglicht artenübergreifende Studien, bestätigen Sie dies jedoch mit artspezifischen positiven und negativen Kontrollen.

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