GNE Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q9Y223

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von GNE

• GNE codiert ein bifunktionales Enzym mit UDP-N-Acetylglucosamin-2-Epimerase- und N-Acetylmannosamin-Kinase-Aktivität, das den geschwindigkeitsbestimmenden Schritt der Biosynthese von Sialinsäuren katalysiert (PubMed:10334995, PubMed:11326336, PubMed:14707127).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:10334995, PMID:11326336, PMID:14707127
• Sialinsäuren sind negativ geladene terminale Zucker auf Zelloberflächen-Glykokonjugaten, die kritische zelluläre Prozesse wie Adhäsion, Signaltransduktion und Erkennung vermitteln.
• Das Enzym ist im Zytoplasma/Zytosol lokalisiert.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen mit gewebespezifischer Expression: Isoform 1 ist breit exprimiert, Isoform 2 kommt überwiegend in der Plazenta vor und Isoform 3 wird in geringen Mengen in Niere, Leber, Plazenta und Dickdarm exprimiert.
• Die höchste gesamte GNE-Expression wird in Leber und Plazenta beobachtet, zusätzlich liegt Expression in Herz, Gehirn, Lunge, Niere, Skelettmuskel und Bauchspeicheldrüse vor.
• GNE ist ein allosterisches Enzym und ein Phosphoprotein, das für seine Kinasefunktion Zink-Metallbindung und ATP benötigt.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen-Peptid (aa 623-722) liegt in der C-terminalen Region von humanem GNE; die Sequenzausrichtung mit Ratten-GNE bestätigt die angegebene Kreuzreaktivität.
• Für Western Blot empfehlt sich die standardmäßige denaturierende SDS-PAGE und Transfer auf eine PVDF- oder Nitrocellulosemembran. Das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt ~79 kDa, obwohl posttranslationale Modifikationen zu leichten Bandenverschiebungen führen können.
• Für ELISA-Anwendungen wird die Beschichtung mit dem Immunogen-Peptid oder rekombinantem GNE-Protein empfohlen; validieren Sie die Assay-Bedingungen in Ihrer spezifischen Probenmatrix.
• Wenn Sie diesen Antikörper in funktionellen Studien verwenden, überprüfen Sie, dass er die enzymatische Aktivität von GNE nicht stört, da er die C-terminale Domäne targetiert.

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