Gli3 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P10071

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: GLI3-Funktion und Lokalisierung

• GLI3 kodiert einen Schlüssel-Transkriptionsfaktor des Hedgehog-Signalwegs, der für die Musterbildung von Gehirn, Gliedmaßen und anderen Körperstrukturen essentiell ist. Verwandte Referenzen: PMID:10075717 PMID:10375510 PMID:10693759
• Das vollständige GLI3-Protein (GLI3FL/GLI3-190, ~190 kDa) wirkt nach Smoothened (SMO)-Aktivierung als transkriptioneller Aktivator, wird aber in Abwesenheit von Hedgehog-Signalen konstitutiv zur Haupt-Repressorform (GLI3R) prozessiert. Verwandte Referenzen: PMID:10375510 PMID:10693759
• GLI3 erkennt spezifisch die Konsensus-DNA-Sequenz 5'-GACCACCCA-3', um die Expression von Zielgenen direkt zu regulieren. Verwandte Referenzen: PMID:10075717
• Das Protein lokalisiert dynamisch im Zellkern, Zytoplasma und primären Zilium, was seine Rolle in der Signaltransduktion widerspiegelt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Phosphorylierung, Methylierung und Ubiquitinierung, die seine Stabilität und Aktivität feinabstimmen (UniProt-Keywords: Acetylierung, Phosphoprotein, Methylierung, Isopeptidbindung, Ubl-Konjugation).
• Mutationen in GLI3 werden mit Entwicklungsstörungen wie dem Greig-Kephalopolysyndaktylie-Syndrom (GCPS) und dem Pallister-Hall-Syndrom (PHS) in Verbindung gebracht (UniProt: Krankheitsvariante).
• Es wird breit in adulten Geweben exprimiert, einschließlich Lunge, Kolon, Milz, Plazenta, Hoden und Myometrium.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (aa 1301–1580) liegt in einer Region stromabwärts der Zinkfinger-Domänen; bestätigen Sie, dass das Epitop sowohl in den Voll- als auch in den prozessierten Isoformen vorhanden ist, wenn Sie Spaltprodukte untersuchen.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~170 kDa; aufgrund der großen Proteingröße können längere Elektrophorese und Transfer erforderlich sein.
• Validieren Sie den Antikörper in Ihrem Probensystem (Mensch, Maus oder Ratte) unter Verwendung geeigneter Positivkontrollen (z.B. Zelllinien mit bekannter GLI3-Expression oder Hedgehog-Signalweg-Aktivierung).
• Bei Immunfluoreszenz/ICC sind je nach Signalstatus nukleäre, zytoplasmatische oder ziliäre Färbemuster zu erwarten.
• ELISA kann für den quantitativen Nachweis verwendet werden, aber optimale Beschichtungs- und Nachweisbedingungen sollten empirisch ermittelt werden.

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