GGT1 Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P19440

Wichtige Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: GGT1-Funktion und Lokalisation

• GGT1 wird als 61 kDa Proenzym synthetisiert (UniProt: 61410 Da), das zu einer 39 kDa schweren Kette und einer 24 kDa leichten Kette prozessiert wird, die sich zum aktiven Enzym verbinden.
• Es katalysiert die Spaltung der Gamma-Glutamyl-Bindung von extrazellulärem Glutathion (GSH) und Glutathion-Konjugaten, wobei Glutamat und Cysteinyl-Glycin freigesetzt werden, wodurch die Glutathion-Homöostase und die Cystein-Versorgung reguliert werden. Zugehörige Referenzen: PMID:21447318, PMID:27791009
• GGT1 wandelt Leukotrien C4 (LTC4) in LTD4 um, ein entscheidender Schritt bei der Synthese von Cysteinyl-Leukotrienen, die potente proinflammatorische Mediatoren sind. Zugehörige Referenzen: PMID:17924658, PMID:21447318, PMID:7673200
• Das Enzym kann auch Transpeptidierungsreaktionen katalysieren, bei denen die Gamma-Glutamyl-Gruppe auf Dipeptide oder Aminosäuren übertragen wird, um neue Gamma-Glutamyl-Verbindungen zu bilden. Zugehörige Referenzen: PMID:17924658, PMID:21447318, PMID:7673200
• GGT1 ist ein Typ-II-Transmembranprotein, das über eine N-terminale Signalankerdomäne an der Plasmamembran verankert ist, wobei seine katalytische Domäne zum extrazellulären Raum hin exponiert ist.
• Das Protein ist stark glykosyliert und enthält Sialinsäuremodifikationen, die für seine korrekte Faltung, Stabilität und enzymatische Funktion entscheidend sind.
• Es wird stark in Niere und Leber sowie in Bauchspeicheldrüse, Magen, Darm, Plazenta und Lunge exprimiert; die Verwendung alternativer Promotoren führt zu gewebespezifischen Isoformen.
• Eine lungenspezifische Isoform scheint katalytisch inaktiv zu sein, was auf eine gewebeabhängige funktionelle Regulation hindeutet.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen wurde gegen ein rekombinantes Fusionsprotein erzeugt, das den Aminosäuren 370–569 des humanen GGT1 (NP_038265.2) entspricht, einer Region, die sich in der C-terminalen leichten Kette befindet. Dieses Design deutet darauf hin, dass der Antikörper die 24 kDa leichte Kette, das 61 kDa Proenzym und möglicherweise die 39 kDa schwere Kette erkennen kann, abhängig von der Probenaufarbeitung und den Gelbedingungen.
• Für Western Blotting können als Positivkontrollproben humane Nieren- oder Leberlysate verwendet werden, die natürlicherweise hohe GGT1-Spiegel aufweisen.
• Bei IHC-P-Anwendungen ist eine Färbung der Plasmamembran zu erwarten; die Bedingungen für die Antigen-Demaskierung müssen möglicherweise für Ihren Gewebetyp und die Fixierungsmethode optimiert werden.
• Dieser Antikörper weist eine berichtete Kreuzreaktivität mit GGT1 von Maus und Ratte auf, jedoch sollten Anwender die spezies-spezifische Reaktivität und die Assay-Bedingungen unabhängig validieren.
• Aufgrund der Multi-Untereinheiten-Natur von GGT1 sollten Sie in Betracht ziehen, reduzierte und nicht-reduzierte Proben zu untersuchen, um die Bandenmuster zu charakterisieren.

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