GBF1 Kaninchen pAb - Q92538

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: GBF1-Funktion und -Lokalisierung

• GBF1 fungiert als Guanosinnukleotid-Austauschfaktor (GEF) für Arf-Familien-GTPasen, initiiert die Vesikelbeschichtung durch Erzeugung aktivierter ARFs via GDP-zu-GTP-Austausch. Es wird in einer Arf-GDP-abhängigen Weise an cis-Golgi-Membranen rekrutiert und durch ARF1, ARF3, ARF4 und ARF5 reguliert. Verwandte Referenzen: PMID:12047556, PMID:12808027, PMID:16926190
• Es ist essentiell für die Rekrutierung des COPI-Hüllenkomplexes an ER-Austrittsstellen, den ER-Golgi-Zwischenkompartimenten (ERGIC) und dem cis-Golgi und vermittelt den COPI-Vesikel-abhängigen retrograden Transport von diesen Kompartimenten zurück zum ER. Verwandte Referenzen: PMID:12047556, PMID:12808027, PMID:16926190
• Im trans-Golgi-Netzwerk rekrutiert GBF1 die Adapter GGA1, GGA2, GGA3, BIG1, BIG2 und den AP-1-Komplex, was den Clathrin-abhängigen Transport erleichtert; diese Funktion erfordert wahrscheinlich GEF-Aktivität gegenüber ARF4 und ARF5. Verwandte Referenzen: PMID:23386609
• Es wird für den Aufbau des Golgi-Apparats benötigt, und seine Phosphorylierung durch AMPK löst den Golgi-Zerfall während der Mitose und unter Stress aus. Verwandte Referenzen: PMID:12808027, PMID:18003980, PMID:18063581, PMID:23418352
• GBF1 könnte an der COPI-abhängigen Rekrutierung von PNPLA2 an Lipidtröpfchen teilnehmen und trägt zur Aufrechterhaltung der mitochondrialen Morphologie bei. Verwandte Referenzen: PMID:19461073, PMID:22185782, PMID:25190516
• In Neutrophilen vermittelt es GPCR-stimulierte Chemotaxis und Superoxidproduktion, indem es ARF1 an der Führungsfront rekrutiert und aktiviert und den Zusammenbau des NADPH-Oxidase-Komplexes erleichtert. Verwandte Referenzen: PMID:22573891
• GBF1 wird ubiquitär exprimiert und ist mit der Charcot-Marie-Tooth-Krankheit und Neurodegeneration assoziiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Angesichts des hohen Molekulargewichts von GBF1 (206 kDa) sollten Sie für eine optimale Auflösung beim Western Blot niedrigprozentige SDS-PAGE-Gele (z.B. 6-8%) in Betracht ziehen.
• Validieren Sie den Antikörper in relevanten humanen und murinen Zelllinien, von denen bekannt ist, dass sie GBF1 exprimieren; die ubiquitäre Expression legt nahe, dass die meisten Zelltypen geeignet sind.
• Für die Immunfluoreszenz optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen, um die Golgi-Morphologie zu erhalten und dem Antikörper Zugang zu diesem membrangebundenen Protein zu ermöglichen.
• Das Immunogen entspricht den N-terminalen Aminosäuren 1-85, was Spezifität über Isoformen hinweg bieten kann; überprüfen Sie dies in Ihrem experimentellen System.

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