FITC-Kaninchen-anti-Ratte-CD45-monoklonaler Antikörper für FC – P04157

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von CD45

• CD45, auch bekannt als gemeinsames Leukozytenantigen (L-CA) und T200, wird bei Ratten vom PTPRC-Gen kodiert. Es handelt sich um eine Rezeptor-Tyrosin-Proteinphosphatase, die für die T-Zell-Aktivierung über den Antigenrezeptor essenziell ist.
• Das Protein besitzt zwei Phosphatasedomänen; die erste Domäne ist katalytisch aktiv, während die zweite die Substratspezifität moduliert. CD45 dephosphoryliert bei der T-Zell-Aktivierung wichtige Signalmoleküle wie SKAP1, FYN und LYN.
• CD45 wirkt nach der Bindung an DPP4 als positiver Regulator der T-Zell-Koaktivierung und interagiert an der Schnittstelle zwischen antigenpräsentierender Zelle und T-Zelle mit CLEC10A, um Aktivierungsschwellen zu modulieren und Auto­reaktivität zu begrenzen.
• Es ist in der Zellmembran lokalisiert, insbesondere in Membranrafts und an der immunologischen Synapse angereichert, wo es an der Signalübertragung des T-Zell-Rezeptors beteiligt ist.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen; bei Ratten werden Isoform 1 und Isoform 2 in Thymozyten und Lymphknoten gefunden, während Isoform 3 und Isoform 4 in Lymphknoten nachgewiesen werden.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören eine starke Glykosylierung und Phosphorylierung, die für seine Funktion und die Interaktion mit Liganden entscheidend sind.
• Das Protein wird den Hydrolasen und Proteinphosphatasen zugeordnet und ist ein Transmembran-Glykoprotein, das an wichtigen Immunprozessen beteiligt ist.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 24–546 des Ratten-CD45 und entspricht wahrscheinlich der extrazellulären Domäne. Dieses Design erzeugt typischerweise Antikörper, die zelloberflächenexprimiertes CD45 erkennen und sich daher gut für die Durchflusszytometrie eignen.
• Für die Durchflusszytometrie sollte der Antikörper titriert werden, um die optimale Konzentration für den jeweiligen Zelltyp und die Färbebedingungen zu bestimmen. Verwenden Sie geeignete Isotypkontrollen und Einzel-Färbekontrollen zur Kompensation.
• Da CD45 ein Pan-Leukozytenmarker ist, sollte sichergestellt werden, dass die Probenvorbereitung die Leukozytenoberflächenantigene erhält; frische oder ordnungsgemäß kryokonservierte Zellen werden empfohlen.
• Berücksichtigen Sie, dass CD45-Isoformen zwischen Leukozyten-Subpopulationen und verschiedenen Aktivierungszuständen variieren. Validieren Sie das Färbemuster des Antikörpers an den Zielpopulationen, um die Reaktivität mit den relevanten Isoformen zu bestätigen.

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