FITC-Kaninchen-Anti-Maus-CD32 monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie – P08101

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation des niederaffinen Immunglobulin-Gamma-Fc-Rezeptors II (CD32)

• Kodiert durch das Fcgr2b-Gen ist der Fc-Gamma-Rezeptor IIB (CD32) ein niederaffiner Rezeptor für die Fc-Region von komplexiertem IgG, der durch alternatives Spleißen in mehreren Isoformen (IIB1, IIB1', IIB2 und ein sezerniertes IIB3) vorliegt.
• Zu den Kernfunktionen gehören die Phagozytose von Immunkomplexen, die Modulation der Antikörperproduktion durch B-Zellen sowie die Herunterregulierung der Aktivierung von B-Zellen, T-Zellen und Mastzellen bei gleichzeitiger Bindung an Antigenrezeptoren.
• Isoform IIB2 vermittelt die Endozytose löslicher Immunkomplexe über Clathrin-beschichtete Vertiefungen, während IIB1 und IIB1' Kappen bilden, aber nicht internalisiert werden.
• Der Rezeptor ist weit verbreitet auf Zellen hämatopoetischen Ursprungs exprimiert, wobei IIB1 bevorzugt in der lymphoiden Linie, IIB2 in der myeloischen Linie vorkommt und IIB3 von Makrophagen in das Serum sezerniert wird.
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst die Zellmembran, zytoplasmatische/zytoskeletale Kompartimente und bei Isoform IIB3 die Sekretion.
• Posttranslationale Merkmale umfassen Disulfidbindungen, Glykosylierung und Phosphorylierung (Phosphoprotein), was mit seiner Architektur aus Immunglobulindomänen übereinstimmt.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Region (AS 30–207), was darauf hindeutet, dass der Antikörper wahrscheinlich die ligandenbindende Domäne erkennt, die allen Hauptisoformen gemeinsam ist; dennoch sollte ein isoformspezifischer Nachweis im jeweiligen Probenystem validiert werden.
• Für die Durchflusszytometrie titrieren Sie den FITC-konjugierten Antikörper auf einer bekannten CD32-exprimierenden Zelllinie (z. B. Maus-Splenozyten oder einer Makrophagenlinie), um die optimale Färbekonzentration zu bestimmen und unspezifische Bindung zu minimieren.
• Verwenden Sie geeignete Isotypkontrollen und Schritte zur Blockierung von Fc-Rezeptoren, um die Spezifität bei der Analyse frischer hämatopoetischer Zellen sicherzustellen.
• Beachten Sie, dass das beobachtete Molekulargewicht je nach Glykosylierung und Isoform variieren kann (31–36 kDa); bestätigen Sie den Nachweis durch Western Blotting, falls eine anwendungsübergreifende Validierung benötigt wird.

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