FITC-Kaninchen-anti-humaner-CD7-monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie – P09564

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD7

• CD7, auch bekannt als GP40, Tp40 und Leu-9, ist ein durch das CD7-Gen codiertes Typ-I-Transmembran-Glykoprotein mit einer einzelnen Transmembrandomäne. Es gehört zur Immunglobulin-Superfamilie und spielt eine wichtige Rolle in der adaptiven Immunität.
• CD7 fungiert auf T-Zellen als kostimulatorischer Rezeptor und verstärkt deren Aktivierung nach der Bindung an seinen Liganden K12/SECTM1. Diese Interaktion fördert die Produktion von Zytokinen wie Interleukin-2 (IL-2), einem wichtigen Wachstumsfaktor für die Proliferation und Effektorfunktion von T-Zellen. Zugehörige Referenzen: PMID:10652336 PMID:1709867
• Auf natürlichen Killerzellen (NK-Zellen) und deren Vorläufern löst die Bindung von CD7 eine starke Induktion von Interferon-gamma (IFN-γ) aus, einem entscheidenden Zytokin für angeborene und adaptive Immunantworten. Zugehörige Referenz: PMID:7506726
• Das Protein ist über eine einzelne Transmembranhelix in der Plasmamembran verankert, wobei seine extrazelluläre N-terminale Region Immunglobulin-ähnliche Domänen enthält, die für die Ligandenerkennung verantwortlich sind. Der kurze zytoplasmatische Schwanz vermittelt die nachgeschaltete Signalübertragung.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen von CD7 gehören die für die strukturelle Stabilität essenzielle Disulfidbrückenbildung sowie die Palmitoylierung (S-Palmitat), die wahrscheinlich die Membranassoziation und Signaltransduktion moduliert.
• CD7 ist ein etablierter Linienmarker, der routinemäßig in der durchflusszytometiebasierten Immunphänotypisierung eingesetzt wird, um T-Zell- und NK-Zell-Subpopulationen in humanen Proben zu identifizieren und zu charakterisieren.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Titrieren Sie den FITC-konjugierten Antikörper, um die optimale Konzentration für Ihren spezifischen Zelltyp und Ihre Testbedingungen zu bestimmen; typische Ausgangskonzentrationen für die Durchflusszytometrie liegen zwischen 0,5 und 5 µg pro 1×10⁶ Zellen.
• Verwenden Sie stets eine geeignete Isotypkontrolle (FITC-konjugiertes Kaninchen-IgG mit irrelevanter Spezifität), um Gates festzulegen und unspezifische Bindungen zu korrigieren.
• Erwägen Sie die Verwendung eines Vitalfarbstoffs, um tote Zellen auszuschließen, die eine erhöhte Autofluoreszenz und eine unspezifische Antikörperbindung aufweisen können.
• Schützen Sie gefärbte Proben aufgrund des FITC-Fluorophors vor längerer Lichtexposition, um das Ausbleichen durch Photobleaching zu minimieren, und erfassen Sie die Daten zeitnah am Durchflusszytometer.
• Validieren Sie die Färbung in relevanten Probensystemen, beispielsweise in mononukleären Zellen des peripheren Blutes (PBMCs) oder etablierten T-Zell-Linien (z. B. Jurkat), um die erwartete Reaktivität und Spezifität zu bestätigen.

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