FGD4 Kaninchen pAb (Polyklonaler Antikörper) für WB, ELISA - Q96M96

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von FGD4

• FGD4, auch bekannt als FYVE, RhoGEF und PH-Domäne enthaltendes Protein 4, Aktinfilament-bindendes Protein Frabin oder FGD1-verwandtes F-Aktin-bindendes Protein, wird durch das FGD4-Gen kodiert und weist aufgrund alternativer Spleißung mehrere Isoformen auf.
• FGD4 fungiert als Guanin-Nukleotid-Austauschfaktor (GEF), der CDC42, eine GTPase der Rho-Familie, spezifisch aktiviert, indem es den Austausch von GDP gegen GTP katalysiert und dadurch die Organisation des Aktin-Zytoskeletts und die Zellform reguliert.
• Das Protein lokalisiert im Zytoplasma, assoziiert mit dem Aktin-Zytoskelett und findet sich auch an Zellvorsprüngen wie Filopodien, wo es die Aktindynamik beeinflusst.
• FGD4 wird in verschiedenen Geweben exprimiert, darunter Gehirn, Kleinhirn, peripherer Nerv, Skelettmuskel, Herz, Gebärmutter, Plazenta und Hoden, was auf eine breite, aber spezifische physiologische Rolle hinweist.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung, und das Protein enthält funktionelle Domänen wie die FYVE-Typ-Zinkfingerdomäne, was seine metallbindenden und phosphoproteinregulatorischen Eigenschaften widerspiegelt.
• Mutationen in FGD4 sind mit der Charcot-Marie-Tooth-Krankheit Typ 4H (CMT4H), einer neurodegenerativen Erkrankung, assoziiert, was seine entscheidende Rolle für die Funktion peripherer Nerven unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Erwarten Sie bei der Western Blot (WB) eine Bande um 87 kDa, die dem vorausgesagten Molekulargewicht entspricht; validieren Sie mit geeigneten Positivkontrollen aus FGD4-exprimierenden Geweben (z. B. Gehirn, peripherer Nerv oder Skelettmuskel).
• Da das Immunogen die Aminosäuren 99–198 abdeckt, berücksichtigen Sie die Möglichkeit, mehrere Isoformen nachzuweisen; führen Sie eine Gegenprüfung mit alternativen Nachweismethoden durch, wenn eine isoformspezifische Auflösung erforderlich ist.
• Standardisieren Sie bei ELISA-Anwendungen die Beschichtungskonzentrationen und Antikörperverdünnungen mit rekombinantem FGD4-Protein oder Zelllysaten, um optimale Signal-Rausch-Verhältnisse zu erzielen.
• Da FGD4 an der Zytoskelettregulation beteiligt ist, können Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle die Epitopzugänglichkeit beeinflussen; testen Sie verschiedene Bedingungen bei der Verwendung von Immunfluoreszenz.
• Bestätigen Sie die Kreuzreaktivität in Maus- und Rattenproben mit geeigneten Lysaten, da Sequenzhomologie zum Nachweis der Nagetier-Orthologen führen kann.

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