F4/80 Kaninchen mAb für IF, IHC-P, ELISA - Q61549

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von F4/80

• F4/80, kodiert vom Gen Adgre1 (Emr1), ist ein adhäsiver G-Protein-gekoppelter Rezeptor (GPCR) der EGF-TM7-Unterfamilie.
• Das vollständige Protein ist ein Zelloberflächen-Glykoprotein mit einem Molekulargewicht von etwa 102 kDa, das mehrere EGF-ähnliche Domänen und eine Sieben-Transmembrandomäne enthält.
• F4/80 fungiert als Orphan-Rezeptor, von dem angenommen wird, dass er Zelladhäsion und Zell-Zell-Interaktionen vermittelt, insbesondere im Immunsystem.
• Es wird spezifisch auf der Oberfläche von Makrophagen exprimiert, mit den höchsten Gehalten auf reifen gewebesständigen Makrophagen, fehlt aber auf Makrophagen in den T-Zell-Bereichen von Lymphknoten und Milz.
• Eine geringe Expression wird auch auf Blutmonozyten nachgewiesen, was F4/80 zu einem etablierten Pan-Makrophagenmarker bei Mäusen macht.
• Der Rezeptor kann zur Entwicklung und Funktion von regulatorischen T-Zellen (Tregs) beitragen und verbindet angeborene und adaptive Immunität.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung und Disulfidbindungsbildung, die typisch für Proteine mit EGF-ähnlichen Domänen sind und wichtig für die strukturelle Stabilität sind.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen besteht aus einem rekombinanten Fragment (AS 367–645) aus der extrazellulären Region von Maus-F4/80, das auf eine Sequenz mit potenziell geringerer Glykosylierungsinterferenz abzielt; überprüfen Sie, ob dieses Epitop in Ihren fixierten Proben exponiert ist.
• Für Immunfluoreszenz (IF) an paraffineingebetteten Schnitten (IF-P) erwägen Sie eine Antigen-Retrieval mit Citratpuffer (pH 6,0) oder EDTA (pH 9,0) und optimieren Sie die Inkubationsbedingungen des Primärantikörpers entsprechend dem Gewebetyp.
• Bei der Immunhistochemie an Paraffinschnitten (IHC-P) validieren Sie den Antikörper an einer bekannten F4/80-positiven Kontrolle (z. B. Maus-Leber-Kupffer-Zellen oder Makrophagen der roten Milzpulpa) und fügen Sie einen Isotyp-Kontrolle zur Bewertung der Hintergrundfärbung hinzu.
• Bei der Durchführung von ELISA verwenden Sie den Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz gegen rekombinantes Maus-F4/80-Protein und überprüfen Sie die Reaktivität mit Ratten-F4/80, wenn der Assay für Rattenproben vorgesehen ist.
• Als Kaninchen-monoklonaler Antikörper bietet er Charge-zu-Charge-Konsistenz; bestätigen Sie jedoch die spezifische Reaktivität in Ihrem experimentellen System, insbesondere bei Verwendung von Knockout- oder Knockdown-Modellen.

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