eNOS Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, IF-P, ELISA - P29474

Kernspezifikationen und Parameter des Produkts

Biologischer Hintergrund: eNOS-Funktion und Lokalisation

• Produziert Stickstoffmonoxid (NO), ein Schlüsselmolekül für die Signalübertragung, das die Entspannung der glatten Gefäßmuskulatur über cGMP-vermittelte Signaltransduktion induziert und für die Blutdruckregulation essenziell ist. Zugehörige Referenzen: PMID:1378832
• Vermittelt die VEGF-induzierte Angiogenese in Koronargefäßen und fördert die Blutgerinnung durch Thrombozytenaktivierung.
• Eine natürlich vorkommende Spleißvariante weist keine eNOS-Aktivität auf und kann die funktionelle eNOS durch Bildung inaktiver Heterodimere herunterregulieren.
• Lokalisiert primär an der Plasmamembran und in Caveolae, findet sich aber auch im Zytoplasma, assoziiert mit dem Zytoskelett und im Golgi-Apparat.
• Stark exprimiert in Thrombozyten, Plazenta, Leber und Niere, was seine Rolle bei der vaskulären Homöostase und Thrombozytenfunktion widerspiegelt.
• Reguliert durch multiple posttranslationale Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, Myristoylierung und Palmitoylierung, und benötigt Cofaktoren wie FAD, FMN, Häm und Zink für die Aktivität.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die C-terminale Region (AS 1000-1203) der humanen eNOS, was die Detektion sowohl von Volllängen- als auch von verkürzten Varianten ermöglichen kann; überprüfen Sie die Spezifität in relevanten Zellmodellen, die eNOS exprimieren.
• Für Western Blot wird eine Bande bei ca. 133 kDa erwartet. Verwenden Sie Molekulargewichtsmarker mit breitem Bereich und optimieren Sie die Probenvorbereitung (z. B. unter reduzierenden Bedingungen) für klare Ergebnisse.
• Bei Immunfluoreszenz (paraffineingebettete Proben) können Protokolle zur Antigen-Demaskierung erforderlich sein; Pilotversuche mit bekannten Positivkontrollen (z. B. humane Nabelschnurendothelzellen) werden empfohlen.
• Der Antikörper kreuzreagiert aufgrund der Sequenzkonservierung mit Maus- und Ratten-eNOS; validieren Sie dies mit entsprechenden Gewebe- oder Zelllysaten dieser Spezies vor quantitativen Vergleichen.
• ELISA-Anwendungen erfordern möglicherweise Schachbrett-Titrationen zur Bestimmung der optimalen Konzentrationen von Beschichtungsantigen und Antikörper; der Antikörper kann für das Einfangen (Capture) oder die Detektion in Sandwich-Immunoassays verwendet werden.

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