eIF5A Kaninchen pAb für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P63241

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: eIF5A-Funktion und Lokalisierung

• eIF5A (Eukaryotischer Translationsinitiationsfaktor 5A-1) ist ein hochkonservierter Translationsfaktor, der die Elongation und Termination fördert und an Polyprolin- oder anderen Motiven gestoppte Ribosomen rettet. Verwandte Referenzen: PMID:33547280
• Es bindet zwischen der E- und P-Stelle des Ribosoms und erleichtert die Peptidyltransfer während des CAT-Tailing-Schritts als Ribosomen-Qualitätskontroll-(RQC)-Cofaktor.
• eIF5A ist an der Aktindynamik, dem Zellzyklusfortschritt und dem mRNA-Abbau beteiligt und trägt zur Stressantwort und Aufrechterhaltung der Zellwandintegrität bei. Verwandte Referenzen: PMID:16987817
• Im Komplex mit Syntenin SDCBP reguliert es die p53/TP53-abhängige Apoptose und moduliert die TNF-vermittelte Apoptose. Verwandte Referenzen: PMID:15371445 PMID:15452064 PMID:17187778
• eIF5A vermittelt die Effekte von Polyaminen auf die Verlängerung und das Überleben neuronaler Prozesse und wird für die Autophagie benötigt, indem es die ATG3-Translation an einem spezifischen ASP-ASP-Gly-Motiv verstärkt und die LC3B-Lipidierung fördert. Verwandte Referenzen: PMID:17360499 PMID:29712776
• Als zellulärer Cofaktor für HTLV-1 Rex- und HIV-1 Rev-Proteine ist eIF5A für den Kernexport von ungespleißten/teilweise gespleißten viralen mRNAs essentiell.
• Das Protein lokalisiert im Zytoplasma, Zellkern und an der Membran des endoplasmatischen Retikulums und unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Acetylierung und Hypusinierung (Hypusinbildung an Lys-50). Es wird in Endothelzellen der Nabelvene und verschiedenen Krebszelllinien exprimiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht dem humanen eIF5A-Protein in voller Länge (aa 1-154), das sowohl die Vorläufer- als auch die reife (hypusinierte) Form detektieren kann. Die Hypusinierung von Lys-50 fügt ~113 Da hinzu, was möglicherweise eine leichte Verschiebung in der SDS-PAGE verursacht; erwägen Sie die Verwendung frisch zubereiteter Proben und geeigneter Gelsysteme, wenn eine Unterscheidung erforderlich ist.
• Für Western Blotting beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~17 kDa; stellen Sie angemessene Transferbedingungen für niedermolekulare Proteine sicher.
• eIF5A ist phylogenetisch konserviert; die Kreuzreaktivität mit der Maus wurde bestätigt, während andere Spezies experimentell validiert werden sollten.
• Bei Immunfluoreszenz oder Immunhistochemie kann eIF5A je nach Zelltyp und Fixierung sowohl zytoplasmatische als auch nukleäre Färbung zeigen; optimieren Sie die Permeabilisierung und validieren Sie im relevanten Proben system.
• ELISA und andere Immunoassays erfordern möglicherweise eine Titration; die Einbeziehung positiver (z. B. HeLa-, Jurkat-Lysate) und negativer Kontrollen wird empfohlen.

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