EHD4 Kaninchen-pAk für WB und ELISA - Q9H223

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: EHD4-Funktion und Lokalisierung

• EHD4 (EH-Domain enthaltendes Protein 4), auch als PAST4 oder hepatozelluläres Karzinom-assoziiertes Protein 10/11 bezeichnet, ist ein Mitglied der EHD-ATPase-Familie, der am intrazellulären Membrantransport beteiligt ist.
• Es fungiert als ATP- und membranbindendes Protein, das die Membranreorganisation und Tubulierung nach ATP-Hydrolyse orchestriert und eine kritische Rolle beim frühen endosomalen Transport spielt (PubMed:17233914, PubMed:18331452). Verwandte Referenzen: PMID:17233914 PMID:18331452
• Während der Sprossangiogenese bildet EHD4 einen Komplex mit PACSIN2 und MICALL1, um recycling-endosom-ähnliche tubuläre Strukturen an asymmetrischen Adhärenskontakten zu erzeugen und so den CDH5-Transport zu regulieren.
• Subzellulär ist EHD4 mit frühen Endosomen und Recycling-Endosomen-Membranen assoziiert und lokalisiert ebenfalls an die Zellmembran und die Adhärenskontakte.
• EHD4 ist hochexprimiert in der Bauchspeicheldrüse und dem Herzen, was gewebsspezifische funktionelle Rollen andeutet.
• Das Protein unterliegt Acetylierung und Phosphorylierung und verfügt über ATP-bindende und Calcium-bindende Motive, die seine regulatorischen Aktivitäten in der Membrandynamik unterstützen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 362–541 (C-terminale Region) von humanem EHD4; überprüfen Sie, ob diese Region in Ihrer Zielspezies konserviert ist, wenn Sie nicht-menschliche/Maus-Proben verwenden.
• Für den Western Blot wird eine Bande in der Nähe von 61 kDa erwartet; erwägen Sie die Verwendung von Positivkontrollen-Lysaten aus EHD4-exprimierenden Geweben wie Bauchspeicheldrüse oder Herz.
• Verwenden Sie im ELISA ein rekombinantes EHD4-Fragment oder das Volllängenprotein als Standard und titrieren Sie den Antikörper, um die optimalen Beschichtungs- und Nachweisbedingungen zu ermitteln.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, evaluieren Sie die Chargen-zu-Chargen-Konsistenz für die Reproduzierbarkeit in quantitativen Assays.

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