EGFR Kaninchen-Polyclonale Antikörper für WB, IP, ELISA – P00533

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von EGFR

• EGFR ist eine Rezeptor-Tyrosinkinase und Mitglied der ErbB-Familie (ErbB-1/HER1). Das EGFR-Gen kodiert für mehrere Isoformen; Isoform 2 kann als Antagonist der EGF-Wirkung wirken.
• Ligandenbindung: EGFR bindet Liganden der EGF-Familie, darunter EGF, TGF-alpha, AREG, Epigen, BTC, Epiregulin und HBEGF. Dies löst die Rezeptor-Homo- und Heterodimerisierung sowie Autophosphorylierung aus (PubMed:10805725, PubMed:27153536, PubMed:2790960, PubMed:12297049, PubMed:15611079, PubMed:17909029). Verwandte Referenzen: PMID:10805725, PMID:27153536, PMID:2790960, PMID:12297049, PMID:15611079, PMID:17909029
• Aktiviertes EGFR rekrutiert Adapterproteine und signalisiert über wichtige Signalkaskaden: RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCgamma-PKC, STATs und potenziell NF-kappa-B (PubMed:27153536, PubMed:11116146). Verwandte Referenzen: PMID:27153536, PMID:11116146
• EGFR phosphoryliert andere Proteine direkt, wie z. B. RGS16 (PubMed:11602604) und MUC1 (PubMed:11483589), wodurch eine Verbindung zu G-Protein-gekoppelten Rezeptorsignalen und dem Beta-Catenin-Signalweg hergestellt wird. Verwandte Referenzen: PMID:11602604, PMID:11483589
• Es reguliert die Zellmigration durch Interaktion mit CCDC88A/GIV (PubMed:20462955) und spielt eine Rolle bei Lernen, Gedächtnis und Schmerzsignalisierung (Nach Ähnlichkeit). Verwandte Referenzen: PMID:20462955
• Subzelluläre Lokalisation: Zellmembran, Endoplasmatikusretikulum-Membran, Golgi-Apparat-Membran, Kernmembran, Endosomenmembran, Endosomen, Zellkern und wird auch sezerniert.
• Ist ubiquitär exprimiert; Isoform 2 wird zusätzlich bei Eierstockkrebs exprimiert.
• Wirkt als Rezeptor für den Eintritt des Hepatitis-C-Virus (HCV) und vermittelt die Infektion von Hepatozyten.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem C-terminalen Peptid (AS 1100–1200) von humanem EGFR; es wird erwartet, dass der Antikörper volllängen EGFR und potenziell wichtige Isoformen erkennt.
• Verwenden Sie für das Western Blotting eine Positivkontrolle wie z. B. A431-Zelllysat; das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt ~134 kDa, aber das Glykoprotein kann aufgrund posttranslationaler Modifikationen größer wandern.
• Erwägen Sie die Verwendung von Phosphatase-Inhibitoren während der Probenvorbereitung, um den Phosphorylierungsstatus zu erhalten, da EGFR nach Aktivierung stark phosphoryliert wird.
• Für die Immunpräzipitation validieren Sie das Antikörper-Perlen-Konjugat und optimieren Sie die Waschbedingungen, um den Hintergrund zu reduzieren.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde nachgewiesen; dennoch empfehlen wir, die Reaktivität im spezifischen experimentellen Modell zu überprüfen.
• Da es sich um einen polyclonalen Antikörper handelt, sollte die Charge-zu-Charge-Konsistenz für kritische quantitative Anwendungen überprüft werden.

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