EGFR-Kaninchen-pAb für WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA – P00533

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von EGFR

• EGFR ist eine Rezeptor-Tyrosinkinase, die Liganden der EGF-Familie (z. B. EGF, TGFA, AREG, BTC, Epiregulin, HBEGF) bindet, um Zellproliferation, Überleben und Differenzierung zu regulieren. Verwandte Referenzen: PMID:10805725, PMID:27153536, PMID:2790960
• Die Ligandenbindung induziert die Dimerisierung und Autophosphorylierung des Rezeptors und aktiviert nachgeschaltete Kaskaden, darunter die RAS-RAF-MEK-ERK-, PI3K/AKT-, PLCγ/PKC-, STAT- und NF-κB-Signalwege. Verwandte Referenzen: PMID:27153536, PMID:11116146
• EGFR phosphoryliert außerdem Nicht-Rezeptor-Substrate wie RGS16 (Modulation der G-Protein-Signalübertragung) und MUC1 (Verstärkung der SRC/β-Catenin-Interaktionen). Verwandte Referenzen: PMID:11602604, PMID:11483589
• Der Rezeptor befindet sich überwiegend an der Zellmembran, wird jedoch zu Endosomen, dem Golgi-Apparat, dem endoplasmatischen Retikulum und dem Zellkern transportiert, wodurch eine räumlich regulierte Signalübertragung ermöglicht wird.
• Mehrere posttranslationale Modifikationen (Phosphorylierung, Ubiquitinierung, Hydroxylierung, Methylierung, Palmitoylierung) stimmen die Aktivität, Stabilität und subzelluläre Verteilung von EGFR fein ab.
• EGFR wird ubiquitär in normalem Gewebe exprimiert; die alternativ gespleißte Isoform 2 wird besonders häufig in Ovarialkarzinomen nachgewiesen und könnte als EGF-Antagonist fungieren.
• Neben endogenen Liganden dient EGFR als Wirtsrezeptor für den Eintritt des Hepatitis-C-Virus (HCV) und erleichtert dessen Internalisierung.
• EGFR ist als Protoonkogen anerkannt; eine Dysregulation von EGFR (Überexpression oder aktivierende Mutationen) treibt zahlreiche Krebsarten voran, wodurch es zu einem zentralen therapeutischen Ziel wird.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen (AS 1021–1210) liegt innerhalb der zytoplasmatischen Domäne, die unter gängigen Denaturierungsbedingungen erhalten bleibt. Für Western Blotting sollte die Verwendung einer Standard-RIPA-Lyse und eines reduzierenden SDS-PAGE-Verfahrens mit geeigneten positiven (z. B. A431, HeLa) und negativen Zelllinien in Betracht gezogen werden.
• Für IHC-P müssen Protokolle zur Antigenrückgewinnung (z. B. Citratpuffer pH 6,0 oder Tris-EDTA pH 9,0) möglicherweise optimiert werden, da EGFR ein Transmembran-Glykoprotein ist, das häufig stark N-glykosyliert ist.
• Obwohl eine Kreuzreaktivität für Mensch, Maus und Ratte berichtet wurde, empfehlen wir, die artspezifische Reaktivität und Signalspezifität in Ihrem experimentellen System zu überprüfen, insbesondere bei der Verwendung genetisch veränderter Modelle.
• Aufgrund des hohen Molekulargewichts (~134 kDa) sollten 8%ige oder Gradientengele für SDS-PAGE verwendet und die Transferbedingungen (z. B. über Nacht im Nassverfahren oder halbtrocken mit geringem Methanolanteil) für das Western Blotting optimiert werden.
• Bei Immunpräzipitationsexperimenten (IP) können eine Vorreinigung der Lysate und die Verwendung einer Kaninchen-IgG-Isotypkontrolle dazu beitragen, unspezifische Bindungen zu reduzieren.
• Bei der Entwicklung eines ELISA kann die Kombination dieses polyklonalen Antikörpers mit einem monoklonalen Fangantikörper die Assay-Empfindlichkeit verbessern. Führen Sie Schachbretttitrationen durch, um die optimalen Konzentrationen zu bestimmen.

CamelBio: Ihre zentrale Beschaffungsplattform

CamelBio ist ein umfassender Partner für die zentrale Beschaffung von Diagnostikherstellern und Forschungslaboren und stellt zuverlässige IVD-Rohstoffe bereit, darunter Antikörper, Antigene und ergänzende Reagenzien. Dieser EGFR-Kaninchen-pAb unterstützt die Forschung in den Bereichen Onkologie und Signaltransduktion. Ergänzend bieten wir validierte Antikörperpaare, optimierte monoklonale/polyklonale Antikörper, Reagenzien in großen Mengen sowie eine maßgeschneiderte Beschaffung für seltene und schwer zugängliche Targets. Von der Konzeptphase bis zur Klinik optimiert CamelBio Ihre Beschaffungsprozesse, um die Entwicklung diagnostischer Produkte zu beschleunigen.