ECE1 Kaninchen pAb - P42892

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ECE1-Funktion und Lokalisierung

• ECE1 ist eine membrangebundene Zink-Metalloprotease, die die Umwandlung von Big Endothelin-1 in das potente vasokonstriktorische Peptid Endothelin-1 katalysiert.
• Es gehört zur M13-Familie der Metalloproteasen und enthält strukturelle Merkmale wie eine Disulfidbindung, Glykosylierungsstellen und mehrere Phosphorylierungsstellen.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen (A, B, C, D), die sich die katalytische Domäne teilen, sich aber in ihren N-terminalen Sequenzen und ihrer Gewebeverteilung unterscheiden.
• Das Protein wird über eine einzelne Signalanker-Transmembranhelix an der Zellmembran lokalisiert, wobei die katalytische Domäne dem extrazellulären/luminalen Raum zugewandt ist.
• ECE1 ist weit verbreitet exprimiert; hohe Spiegel werden in Endothelzellen, Plazenta, Lunge, Herz und Nebenniere nachgewiesen, mit isoform-spezifischer Verteilung in Leber, Niere, Hoden und glatten Muskelzellen.
• Mutationen in ECE1 werden mit dem Morbus Hirschsprung in Verbindung gebracht, einer Entwicklungsstörung des enterischen Nervensystems, was seine Rolle über die Vasoregulation hinaus unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der C-terminalen Region (aa 670-770) von humanem ECE1, die einen Teil der katalytischen Domäne umfasst und möglicherweise mehrere Isoformen erkennt.
• Für Western Blotting ist unter reduzierenden Bedingungen ein Band bei etwa 87 kDa zu erwarten; erwägen Sie die Verwendung frischer Proteaseinhibitoren und vermeiden Sie Kochen, um Epitope zu erhalten.
• Bei IHC-P und IF/ICC sollten Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle optimiert werden, um die Membranlokalisierung von ECE1 zu berücksichtigen; eine enzymatische Antigen-Demaskierung kann die Detektion verbessern.
• Für ELISA-Assays kann das Beschichten mit dem rekombinanten Immunogen oder einem verwandten Peptid als positive Kontrolle dienen; Absorptionsversuche werden zur Bestätigung der Spezifität empfohlen.
• Der Antikörper zeigt Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-ECE1, die Leistung sollte jedoch vor quantitativen Studien im relevanten Gewebe oder der relevanten Zelllinie validiert werden.

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